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  • 發布時間:2020-07-27 13:03 原文鏈接: 分子克隆蛋白表達實驗指南(十六)

    Amp(50mg/ml)
            溶解1g
    Amp于足量的水中,最后定容至20ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以20~50ug/ml的終濃度添加于生長培養基,1:1000比例稀釋
          
          Kan(50mg/ml)
            溶解1g
    Kan于足量的水中,最后定容至20ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以20~50ug/ml的終濃度添加于生長培養基,1:1000比例稀釋
      
          EB
      100ml蒸餾水中加1g EB,磁力攪拌數小時,以確保完全融解。然后用鋁箔包裹容器或將容器轉移至棕色瓶中,室溫保存
      
      TAE(50×)
      Tris base             242g
          冰醋酸              57.1ml
          EDTA               0.05mol
          調PH至8.5,定容至1L
      
      考馬斯亮藍R-250染色液
      乙醇                  135ml
      水                    135ml
      冰醋酸                30ml
      考馬斯亮藍R-250粉末  0.75g
            過濾除去顆粒,乙酸過濾后加入
      
          溶菌酶(10mg/ml)
            每克溶菌酶溶于100ml 10mM,PH=8.0,滅菌的TrisCl中,4C store
      
          DTT(1M)
            用20ml 0.01M乙酸鈉溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,過濾除菌后分裝成小份,儲存于-20C
      
      dNTPs
      100mM初濃度,按照每種20ul量加,最后定容至800ul。終濃度為每種dNTP 2.5mM
      
      PMSF(50mM)
      溶解87mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的異丙醇中,定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹,-20C保存。
         
      20% Triton-100
      20ml 100% Triton-100溶于80ml PBS或TBS中,水浴攪拌融化。使用時加至所需終濃度
      
      5% X-Gal
      溶解50mg的X-Gal于1ml的DMF或DMSO中, 用鋁箔包裹裝液管,貯存于-20℃。每次配1ml,分裝。否則放在-20C X-Gal最多保存4個月
      
      Glutathione Elution Buffer
         10 mM reduced glutathione in 50 mM Tris-HCl (pH 8.0). Dispense in 1-10 ml
      aliquots and store at -20°C until needed. Avoid more that five freeze/thaw
      cycles.
      (配40ml 20mM的:0.242Tris base到40ml ddwater中,PH8.0,再加glu0.246g。)

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