1、前言
20新世紀60時代至今，大家慢慢發覺多糖具備繁雜多種多樣的微生物特異性和作用，如多糖有免疫調節作用可做為廣譜免疫力硫化促進劑，做為藥品能夠治療風濕病、漫性慢性乙型肝炎、癌證等；還具備抗感染藥、抗放射線、抗凝血、降血脂、降血糖，推動核苷酸與蛋白的微生物生成等功效。菱，別稱凌角、水菱角、風菱，為菱科菱屬綠色植物烏菱TrapabicomisOsbeck的種子，據參考文獻記述，其果核、果柄、果、莖及葉柄均可進藥，有健胃消食止痢、防癌等功效；還可用以緩解胃潰瘍癥狀、急性腸炎、食管癌、宮頸癌及宮頸癌等。
本科學研究初次從天然的菱角殼中獲取分離出來出多糖，并對多糖的單糖構成開展了深進的科學研究，為深化開發設計和運用天然的凌角資源出示了科學論證。
2、試驗部分
2.1 試品、實驗試劑與儀器設備市面上的凌角往仁后，殼晾干，破碎預留。單糖及雙糖標準物質(半乳糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖、甘露糖、果糖、乳糖和蜜二糖)均購自ChemService，純凈度超過98％。常用化學藥品除乙醇和酒精為色譜純外，其他均為分析純。UV-2501PC紫外線光譜分析儀(日本島津企業)；NicoletMagna560傅里葉變換光譜分析儀(英國尼高力企業)；VarianUnityPlus600磁共振波譜儀(英國瓦里安企業)；HP6890和HP5973氣象色譜儀-質譜分析聯用儀(英國安捷倫公司)。
2.2 試驗方式
(1)多糖化學物質的獲取及提純方式 稱量800g清洗晾干的菱角殼，加微信好友1:1酒精-乙醚溶液，65℃水浴流回1～3h往脂；沉渣中放水，9O～100℃水浴獲取4～6h，拆換凈化水不斷獲取2～3次，合拼暗紅色多糖萃取液，過慮，萃取。向萃取液加微信好友3／7倍容積的酒精，離心分離沉定，凍干得多糖粗品F1。往上清液里加人1.0倍容積的酒精，離心分離沉定，凍干得多糖粗品F2。以此方式 ，往上清液中依次加微信好友1.5和4.0倍容積酒精，各自獲得多糖粗品F3和F4。。若立即向原多糖萃取液里加人4倍容積的無水乙醇，則獲得混和多糖粗品F5。用Sevag法除往多糖粗品中的蛋白，H2O2法除往黑色素，分析72h后，萃取，凍干，即得多糖純品；
(2)多糖的水解反應取多糖試品10mg于安瓶精華里加人3moL／L三氟乙酸2mL，密封性后在120℃控溫中水解反應6h，用N2烘干三氟乙酸，加乙醇并烘干，水解反應物質加進去0.6mL0.05mol／LNaOH水溶液，加上5mgNaBH4，室內溫度下反映8—10h，加少量甲酸溶解過多的NaBH4，至0造成才行。蒸干反映液，以酸堿性乙醇清洗反映物質，蒸干乙醇液，反復3—4次以除往硼酸根，最終加進去乙醇蒸干并且于烘干箱中105℃除凈水份；
(3)乙酰化衍化法取水解反應得的單糖3mg，加進去0.5mL吡啶，1mL乙酸酐，加溫2h，水冷卻后加二甲苯2mL，用N2烘干，加進去氯仿，純凈水清洗，用N2烘干獲得黃棕色物質。此乙酰化的單糖醇用CHC13稀釋液后開展氣象色譜儀-質譜分析；(4)三甲醫院基硅烷化衍化法取水解反應得的單糖試品6mg，加吡啶0.6mL，六甲基四硅胺烷0.2mL，三甲基氯硅烷0.2mL，震蕩，靜放，取上清液開展氣象色譜儀-質譜分析。
2.3 GC-MS剖析標準HP-5方解石毛細管色譜柱(英國安捷倫公司)，(50m×0.22mmi。d。，0.25μm)；EI源，電子器件動能70eV，含量掃描儀范疇33—550，進樣口溫度260℃，插口溫度270℃，載氣氦氣水流量1.2mL／min，分離比20：1，程序升溫：100℃→1O℃／min150℃→15℃/min260℃(40min).
3、結果與探討
3.1 菱角殼提取液中多糖的評定剖析Molisch試驗：鹽酸和多糖水溶液分成雙層，層與層中間有藍紫色環出現。表明提取液確含糖量。混和多糖F5純品的FT-IR譜圖。譜圖中好幾處可看到多糖的特點峰，如：3435/cm，2924/cm的消化吸收峰各自為O—H，C—H的伸縮式震動峰，1193/cm，1037/cm處的消化吸收峰是多糖中C—O，C—O—C伸縮式震動和C—OH的彎折震動特點峰，在1000—700/cm的消化吸收峰則是α-和β-吡喃單糖產生的特點。
混和多糖F5純品的HNMR譜圖。譜圖中δ3.5—δ5.5中間看得見好幾個糖質子的沒有響應數據信號峰，在其中δ4.605、δ4.7和δ4.9223個峰是β-吡喃環帶的質子數據信號，而δ5.238、δ5.348、δ5.446、δ5.465和δ5.515則將會來源于于α-吡喃環帶的質子，不難看出，此多糖將會是由多種多樣單糖構成。
3.2 凌角殼多糖中單糖構成的明確試品F1一F4水解反應物質的乙酰化化合物經氣象色譜儀-質譜分析，根據與規范色譜圖對比較為和質譜分析殘片分析，明確了其單糖構成及摩爾比。統計數據說明，4種多糖各自由不一樣摩爾比的幾類單糖(如阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、果糖)和二糖(乳糖、蜜二糖)構成，在其中多糖F2一F4的單糖構成同樣，僅僅摩爾比略有不同；而F1則由5種單糖和2種二糖構成。果糖，半乳糖和甘露糖在4種多糖中占的占比很大，是凌角多糖的關鍵成份。
混和多糖試品F5的甲基硅烷化化合物的GC-MS，經殘片剖析并運用規范質譜分析NIST庫開展查找，l1個色譜分析峰被確認為單糖的甲基硅烷化化合物。因為在衍化化全過程中α型和β型吡喃和呋喃異構體的先天性，相同單糖能夠先天性幾類化合物。因而，只驗出5種單糖，主要包括二種戊糖(阿拉伯糖和木糖)，3種己糖(甘露糖，半乳糖和果糖)。從峰總面積百分數統計數據可以看得出，果糖、半乳糖、木糖和甘露糖在該混和多糖中常占的占比很大，是凌角多糖的關鍵成份，這與乙酰化剖析的結果基本相同。
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