實驗方法原理 血清中鎂,鎘離子在堿性溶液中段與甲基麝香草酚藍染色結合,呈或藍紫色化合物加人EGTA可掩蓋離子的干擾。
實驗步驟
一、 實驗試劑:
1. 堿性緩沖液:稱取無水亞硫酸鈉2g,疊氮鈉100mg,甘氨酸750mg和乙二醇-雙-(2-氨基乙醚)四乙酸 [Ethylene glycol-bis(2-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetrazcetic acid 簡稱:EGTA] 90mg于小燒壞中,加lmol/L氫氧化鈉 23ml使其溶解,轉入100ml容量瓶中,加去離子水至刻度。
2. 顯色劑:精確稱取甲基麝香草酚藍(AR)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.6g于燒壞中,加1mol/L鹽酸溶液10ml,使其溶解后轉入100ml容量瓶中,加去離子水至刻度,混勻,置棕色中保存。
3. 顯色應用液:臨用前將上述1液和2液等量混合即可。
4. 鎂標準液:(2mg/dL)
二、實驗操作:取經稀鹽酸處理的去離子水清洗的干燥試管3支,標明測定標準和空白管,然后按表進行操作:
混勻,用分光光度計600nm波長,10mm比色杯,以空白管調零讀取各管光密度值。
三、計算:
血清鎂mmol/L=測定管吸光度/標準管吸光度×0.823
參考值:0.67-l.04mmol/L
注意事項
1. 溶血標本對本測定有干擾,故應避免。
2. EGTA是一個金屬絡合劑,在堿性條件下能結合鎂而不結合鎂,但濃度過高也能絡合鎂,故稱量必須準確。