實驗方法原理
液氮研磨可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯仿時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。
實驗材料 菌絲體
試劑、試劑盒 NaCl蒸餾水SDSTris-HClEDTADEPCSSTE乙醇酒精酚：氯仿：異戊醇LiCl
儀器、耗材 液氮罐離心管離心機水浴鍋冰箱紫外分光光度計電泳儀
實驗步驟
一、實驗試劑準備
1. RNA提取緩沖液（CTAB）：2% CTAB（W/V），2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP（W/V），100 mM Tris-HCl（pH8.0，DEPC處理的水配置），25 mM EDTA，0.5 g/L 亞精胺Spermidine，2.0 M NaCl，2%巰基乙醇（V/V，使用前加入）。由于在高溫滅菌條件下，Tris-HCl要和DEPC發生反應，所以配RNA提取緩沖液時直接用DEPC處理的水配制即可。
2. SSTE：1 M NaCl，0.5% SDS（W/V），10 mM Tris-HCl pH8.0，1.0 mM EDTA。
3. 10 M LiCl 直接用蒸餾水配10 M LiCl，加1‰的DEPC過夜后，高溫滅菌。
4. DEPC處理水 用1‰的DEPC處理蒸餾水過夜，高溫滅菌。
5. 3M NaAc，氯仿:異戊醇（24:1），酚（pH4.5）:氯仿:異戊醇（25:24:1），無水乙醇，70%酒精。
二、實驗步驟
1. 實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱，離心管中加入ME（巰基乙醇），（10 mL加80 ul，50 mL中加入300 ul）。
2. 取約0.8 g菌絲體（液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可，固體培養就更好說了），在液氮中迅速磨成精細粉末，裝入50mL離心管，按1g材料8 mL的量加入預熱的RNA提取液，顛倒混勻。
3. 65℃水浴3-10 min，期間混勻2-3次。
4. 加入等體積的酚（注意是酸酚pH4.5）:氯仿:異戊醇（25:24:1）抽提（10 000 rpm，4℃，5 min）。
5. 取上清，等體積的氯仿:異戊醇（24:1）抽提（10 000 rpm，4℃，5 min）。
6. 加入1/4V體積10 M LiCl溶液，4℃放置6h以上（或過夜）。
7. 10 000 rpm，4℃離心20 min。
8. 棄上清，用500 ul SSTE溶解沉淀。
9. 酚:氯仿:異戊醇（25:24:1）抽提兩次，氯仿:異戊醇（24:1）抽提1次（10 000 rpm，4℃，5 min）。
10. 加2V體積的無水乙醇，在-70℃冰箱沉淀30 min以上。
11. 12 000 rpm，4℃離心20 min。
12. 棄上清。沉淀用70%酒精漂洗一次，干燥。
13. 加200 ul的DEPC處理水溶解。
14. 用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量。
（在抽提過程中，若蛋白質含量或其它的雜質還較多，可以增加抽提次數。）
注意事項
1. 提取RNA請盡量在低溫下操作，如果條件不容許，在室溫下操作的時間要盡可能的短。