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  • 發布時間:2020-08-17 11:16 原文鏈接: 沉淀σ32和RNA聚合酶實驗

    試劑、試劑盒 聚乙烯亞胺

    儀器、耗材 SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠

    實驗步驟

    材料與設備


    SDS-PAGE 電泳裝置


    聚丙烯酰胺小膠(10%)


    試劑


    聚乙烯亞胺(PEI)(6% 儲液,pH7.9)


    (配方,見“試劑的配制”,pp.184~189)


    操作程序


    1)0.2%DOC 上清 (見 p.153), 取 6x50-ul 等分試樣。各試樣分別加入 0、1、2、3、4 和 5ul 6%PEI 儲液(使 PEI 濃度分別為 0%、0.12%,0.24%、0.36%、0.48% 和 0,6%), 充分混勻,孵育 5~10 min。


    2) 用微型離心機離心 1ml,離下沉淀物。如需要,取上清樣品,供快速蛋白質斑點印跡試驗(見 PP.172?173) 或 SDS 凝膠電泳分析用。做斑點印跡試驗應立即進行。


    結果


    典型的顯示 PEI 滴定實驗結果的 SDS 凝膠照片,見圖 3-5。


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