<li id="omoqo"></li>
  • <noscript id="omoqo"><kbd id="omoqo"></kbd></noscript>
  • <td id="omoqo"></td>
  • <option id="omoqo"><noscript id="omoqo"></noscript></option>
  • <noscript id="omoqo"><source id="omoqo"></source></noscript>
  • 發布時間:2020-08-17 17:29 原文鏈接: α淀粉酶的測定

    實驗方法原理 將淀粉切割成小片段和麥芽糖。不同來源的 α-淀粉酶的最適 pH 不同。從 Bacillus subtilis 中提取的細菌酶在 pH 5.5 時有其最高活性,并且必須采用適合的緩沖溶液。

    實驗材料 4-α-D-葡聚糖葡聚糖水解酶

    試劑、試劑盒 磷酸鉀麥芽糖溶液淀粉溶液二硝基水楊酸試劑

    儀器、耗材 分光光度計

    實驗步驟

    實驗所需「試劑」具體見「其他」


    0.05 ml 淀粉溶液


    0.05 ml 酶樣品(稀釋于 0.1 mol/L 磷酸鉀,pH7.0)。


    25 ℃ 培養 5 min


    0.1 ml 二硝基水楊酸試劑


    在 100 ℃ 混合 10 min


    1 ml H2O


    測 546nm 處吸收值值。


    借助校準曲線測出酶的活性。濃度范圍在 4~30 ul 的麥芽糖溶液,用水補充到 0.1 ml,而后向每個樣品中添加 0.1 ml 二硝基水楊酸試劑。100℃ 孵育 10 min 后,加入 1 ml 水,并測 546 nm 處吸收值。


    計算。


    1 個單位被定義為:25℃、pH 7.0 時,每分鐘從可溶淀粉中釋放 1 mol 還原基團的酶量。

     

    注意事項


    其他

    試劑:


    0.1 mol/L 磷酸鉀,pH 7.0


    10 mmol/L 麥芽糖溶液(一水合物,Mr=360.3;36 mg 麥芽糖溶于 10 ml 水中)


    淀粉溶液(0.5 g 可溶淀粉,17.5 mg NaCl,溶解于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.0,煮沸溶解)


    二硝基水楊酸試劑(3,5-二硝基水楊酸,2-羥基-3,5 二硝基苯甲酸,Mr=228.1;溶解 1 g 于 20 ml 2 mol/L NaOH 和 50 ml 水,溶解 30 g K-Na-酒石酸并用水補充至 100 ml)。


    <li id="omoqo"></li>
  • <noscript id="omoqo"><kbd id="omoqo"></kbd></noscript>
  • <td id="omoqo"></td>
  • <option id="omoqo"><noscript id="omoqo"></noscript></option>
  • <noscript id="omoqo"><source id="omoqo"></source></noscript>
  • 1v3多肉多车高校生活的玩视频