實驗方法原理 用胰蛋白酶消化 75 cm2 培養瓶中的細胞，計數后與藻酸鹽溶液混合。用注射器將藻酸鹽細胞懸液滴加入氯化鈣溶液，制成微珠，然后懸浮培養。
實驗材料 D-PBSA胰蛋白酶
試劑、試劑盒 適合細胞生長的培養液藻酸鈉溶液
儀器、耗材 無菌濾器
實驗步驟
鹽溶液，含有：
(a)NaCl，8.0 g
(b)D-葡萄糖，l.0 g
(c)用 UPW 配制1 L
(d)用 HCl 或 NaOH 調整 pH 為 7.2~7.4
(e)高壓滅菌
0.1 mol/L CaCl2，含有：
(a)鹽溶液，500 ml
(b)CaCl2 2H2O，7.35 g
(c)用 HCl 或 NaOH 調整 pH 為 7.2~7.4
(d)高壓滅菌
1. 按 1.5 % 濃度將藻酸鹽溶解于鹽溶液中，在室溫下將溶液攪拌至少 4 h，直至藻酸鹽完全溶解。溶解于鹽溶液的藻酸鹽可以在4°C 條件下儲存 3 d。
2. 用滅菌的無熱源活性的 0.45 μm 濾器將藻酸鹽過濾 3 次。最后一次過濾應當在藻酸鹽使用前進行。
3. 將細胞培養至匯合狀態。
4. 用 3 ml 胰蛋白酶（適合于細胞傳代培養的濃度）消化細胞，然后細胞計數。
5. 將細胞離心（900 r/min，4 min ) 后，完全棄去含有胰蛋白酶的上清液。
6. 通過將細胞輕輕地懸浮于藻酸鹽中，使細胞與藻酸鹽混懸，調整細胞密度為 2×106 個/ml。此刻，在藻酸鹽中不產生氣泡是至關重要的，因為產生氣泡將會導致微珠內形成空隙。
7. 將藻酸鹽懸浮的細胞轉移入套有 27G 針的無菌注射器中。
8. 利用迂冋運動將藻酸鹽細胞懸液滴加入含有 0.1 mol/L CaCl2 的燒杯中，CaCl2 誘發藻酸鹽微珠的形成。
9. 使微珠膠化 10 min，然后用 D-PBSA 洗 3 次。
10. 最后用生長培養液洗微珠。
11. 將微珠放入含有生長培養液的 175 cm2 培養瓶中，在 37°C、100 % 相對濕度和 5% CO2 條件下培養。