實驗步驟
根據實驗方案誘導細胞凋亡,制備單細胞懸液,使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒,通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸(PS)的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。
1. 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×,冰育。
2. 懸浮細胞在低溫環境中,用PBS洗滌細胞2次(800~1000rpm離心,5min)。
3. 棄上清,加入490μl預冷的結合緩沖液重懸細胞(細胞濃度為105~106/ml)。
4. 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于細胞懸浮液中,輕輕混勻。
5. 將試管置于冰上,避光孵育10分鐘。
6. 上FCM檢測。