實驗方法原理
實驗材料 組織樣品
試劑、試劑盒 NaOH戊二醛硝酸鑭鋨酸-二甲胂酸鈉緩沖液
實驗步驟
1. 4% 硝酸鑭配制,PH 7.8,用 NaOH 調,邊加邊攪拌,使溶液呈乳白色。
2. 15~25℃ 條件下,組織用 1%~1.5% 硝酸鑭、2%~3% 戊二醛-0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液前固定2~4 h。
3. 1% 硝酸鑭-二甲胂酸鈉緩沖液漂洗 30 min 左右。
4. 1% 硝酸鑭、1% 鋨酸-二甲胂酸鈉緩沖液固定 1~2 h。
5. 包埋、切片同常規。
注意事項
1. 由于示蹤劑的滲透有限,修塊時需注意,不要太深。
2. 示蹤劑的滲透情況與孵育時的條件有關>如溫度、時間等,因此實際應用還需根據具體情況摸索。
3. 由于鑭有電子染色作用,所以一般情況下不需再染色,當然按照常規方法進行染色也可,對結果并無影響。
4. 組織或細胞在含_液體中的時間不宜過長,否則切片困難。