ＧＰ７３在肝細胞癌和膽管細胞癌中的表達
鄒 凡１ａ，揭小華１ａ，巢映暉１ｂ，傅華群１ｂ，王榮勝２，王開陽１ｃ，昌毓穗１ｄ
（１．南昌大學ａ．臨床醫學院２０１２級；ｂ．第二附屬醫院肝膽外科；ｃ．第二附屬醫院急診科；
ｄ．附屬醫院急診科；２．江西省人民醫院ＩＣＵ，南昌３３０００６）
摘要：目的
探討血清高爾基體糖蛋白７３（Ｇｏｌｇｉｐｒｏｔｅｉｎ－７３；ＧＰ７３）對肝細胞癌及膽管細胞癌的診斷價值；方法采用雙抗體夾心酶聯免疫（ＥＬＩＳＡ）定量測定方法，檢測６０例肝細胞癌患者（Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＨＣＣ）、５０例膽管細胞癌患者（ｉｎｔｒａｈｅｐａｔｉｃｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＩＣＣ）以及３０例健康獻血者血清標本中高爾基體糖蛋白（Ｇｏｌｇｉｇ－
ｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＰ３７）的濃度。結果
血清 ＧＰ３７在 ＨＣＣ 組的表達明顯高于ＩＣＣ 組以及健康組（Ｐ＜０．０５）；ＧＰ３７ 在診斷 ＨＣＣ 的敏感度和準確度均要優于
ＡＦＰ（Ｐ＜０．０５），二者特異度的差異無統計學意義；ＧＰ３７ 在診斷 ＨＣＣ 的敏感度、特異度以及準確度均高于診斷ＩＣＣ。結論
ＧＰ３７有可能成為診斷和鑒別診斷 ＨＣＣ 和ＩＣＣ 新的臨床腫瘤標
記物。
關鍵詞：高爾基體糖蛋白７３；肝細胞肝癌；膽管細胞癌
中圖分類號：Ｒ－３３ 文獻標志碼：Ａ 文章編號：２０９５－４７２７（２０１７）０１－００１９－０４
ＤＯＩ：１０．１３７６４／ｊ．ｃｎｋｉ．ｎｃｄｍ．２０１７．０１．００５
ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＰ７３ｉｎＨｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒＣａｒｃｉｎｏｍａａｎｄ ＩｎｔｒａｈｅｐａｔｉｃＣｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ
ＺＯＵＦａｎ１ａ，ＪＩＥＸｉａｏ－ｈｕａ１ａ，ＣＡＯ Ｙｉｎｇ－ｈｕｉ１ｂ，ＦＵ Ｈｕａ－ｑｕｎ１ｂ， ＷＡＮＧ Ｒｏｎｇ－ｓｈｅｎｇ２，ＷＡＮＧ Ｋａｉ－ｙａｎｇ１ｃ，ＣＨＡＮＧ Ｙｕ－ｈｕｉ１ｄ
（ａ．２０１２ＧｒａｄｅｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ；ｂ．ＥｍｅｒｇｅｎｃｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄ
ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ；ｃ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ
ＨｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙＳｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ；
ｄ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｍｅｒｇｅｎｃｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，ＮａｎｃｈａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
２．ＩｎｔｅｓｃｖｅＣａｒｅＵｎｉｔ，ＪｉａｎｇｘｉＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｅｏｐｌｅ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３０００６，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｖａｌｕｅｏｆｓｅｒｕｍ Ｇｏｌｇｉｐｒｏｔｅｉｎ－７３（ＧＰ７３）ｉｎｔｈｅｄｉａｇｎｏ－
ｓｉｓｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＨＣＣ）ａｎｄｉｎｔｒａｈｅｐａｔｉｃｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＩＣＣ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ
Ｓｅｒ－ ｕｍｌｅｖｅｌｓｏｆＧＰ７３ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＥＬＩＳＡｉｎ６０
ＨＣＣｐａｔｉｅｎｔｓ，５０ＩＣＣｐａｔｉｅｎｔｓａｎｄ３０ｈｅａｌｔｈｙ
ｂｌｏｏｄｄｏｎｏｒｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
ＳｅｒｕｍｌｅｖｅｌｓｏｆＧＰ７３ｉｎＨＣＣｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅ
ｉｎＩＣＣｐａｔｉｅｎｔｓａｎｄｈｅａｌｔｈｙｓｕｂｊｅｃｔｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ＧＰ３７ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｓｍｏｒｅｓｅｎｓｉｔｉｖｅ
ａｎｄａｃｃｕｒａｔｅｔｈａｎＡＦＰｄｅｔｅｃｔｉｏｎｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ
ＨＣＣ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒ－
ｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙａｎｄａｃｃｕｒａｃｙｏｆＧＰ３７ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｉｎｄｉａｇ－
ｎｏｓｉｎｇ ＨＣＣ ｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｄｉａｇｎｏｓｉｎｇＩＣＣ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＧＰ３７
ｍａｙｂｅａｎｅｗｃｌｉｎｉｃａｌ
ｔｕｍｏｒｍａｒｋｅｒｆｏｒｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＨＣＣａｎｄＩＣＣ．
ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｇｏｌｇｉｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ７３；ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ；ｉｎｔｒａｈｅｐａｔｉｃｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ
原發性肝癌（ｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｉｃｃａｎｃｅｒ，ＰＨＣ）在我國是一種常見的惡性腫瘤，發病率有逐年上升趨勢［１］。根據形態學和細胞遺傳學對原發性肝癌的定義，原發性肝癌主要分為肝細胞癌、膽管細胞癌患者
（ｉｎｔｒａｈｅｐａｔｉｃｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＩＣＣ）和
混合癌［２］。肝細胞癌和膽管細胞癌是*常見的惡性腫瘤，且進展快、惡性程度高、預后差以及侵襲性強［３－４］。甲胎蛋白（ａｌｐｈａｆｅｔｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＡＦＰ）是一種廣泛應用于臨床診斷原發性肝癌的傳統血清標志物。但大量的研究和臨床經驗發現，ＡＦＰ
對 ＰＨＣ 的診斷價值仍具有一定的局限性：１）敏感度為４０％ ～６５％，特異度為 ７６％～９６％；２）對早期的發現更差，約３０％ 的
ＨＣＣ患者 ＡＦＰ 陰性；３）對于ＩＣＣ 沒有診斷價值［５－８］。因此，為進一步提高對原發性肝癌診斷的準確率和早
期診斷水平，尋找一種更高靈敏度和特異度的血清標志物的研究成為一大熱點［９］。
已有研究發現 Ｐ７３ 與 ＰＨＣ
密切相關，且有望成為診斷肝癌更好的、更早期的血清標志物。然而， 對于 ＧＰ７３在不同細胞型肝癌患者中的表達是否存在差異未見有研究。為此本研究，以
ＨＣＣ 患者、ＩＣＣ 患者和健康人群的血清為研究對象，通過雙抗體夾心 ＥＬＩＳＡ 法定量測定 ＡＦＰ 和 ＧＰ７３ 的濃度，并分析和比較
ＧＰ７３ 和 ＡＦＰ 在 ＨＣＣ 組、ＩＣＣ 組和健康對照組中敏感度、特異度以及準確度的關系。為探索
ＧＰ７３對肝細胞癌和膽管細胞癌的鑒別和診斷提供理論依據。
１ 材料與方法
１．１ 實驗標本
收集２０１５年７月至２０１６年３月南昌大學第二附屬醫院、附屬醫院以及江西省人民醫院手術治療且具有完整臨床信息的６０
例 ＨＣＣ 患者（ＨＣＣ組）、５０例ＩＣＣ 患者（ＩＣＣ 組）和３０
例健康獻血者的血清標本，所有患者均經術后病理檢測確診，并隨機挑選入組。依據世界衛生組織 ＴＮＭ
分期，在１１０例肝細胞癌中Ⅰ期２３例，Ⅱ期３８例，Ⅲ期４４例，Ⅳ期５例。在６０ 例 ＨＣＣ 組中有５６ 例有乙肝背景的
患者，占 ＨＣＣ
總例數９３．３％；男３７ 例，女２３ 例，年齡２３～７２歲，平均年齡５６歲。５０例ＩＣＣ 患者中有
３０例具有乙肝背景，占總例數的６０．０％；男２２ 例，女２８例，年齡４５～６８歲，平均年齡５９ 歲。３０
例健康人群中男女比例是２１，平均年齡４５ 歲。所有研究對象均對此次研究知情同意。
１．２ 實驗方法
１．２．１ 血清標本采集
抽取 ＨＣＣ、ＩＣＣ 患者術前及健康體檢人群的靜脈血 ２ ｍＬ，經 離心機分離得到血清，并 放置在
－２ ℃ 環境中保存。
１．２．２ ＡＦＰ 與 ＧＰ７３蛋白測定
ＡＦＰ
與 ＧＰ７３ 測定所用試劑盒由上海勁馬生物科技有限公司提供，批號分別為 １１０５２９－１ 以及 １１０５１５－３。采用雙 抗體夾心 ＥＬＩＳＡ
法檢測 ＧＰ３７和 ＡＦＰ 的血清濃度，操作按照公司試劑盒上的說明書進行。吸光度（ＯＤ 值）用上海旦鼎貿易有限公司生產的美國寶特
Ｂｉｏ－Ｔｅｋ 酶標儀在４５０ｎｍ 波長下測定，操作按儀器說明書進行。
１．２．３ 結果測定
采用目前國內外較為通用的結果測定法，即以標準物的濃度為橫坐標，相應各點
ＯＤ 值對應的數值為縱坐標制作標準曲線。根據標準物的濃度與ＯＤ 值計算出標準曲線的直線回歸方程，將樣品的ＯＤ
值代入回歸方程中計算出樣品濃度，然后乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。根據標準曲線分析得出 ＧＰ７３診斷 ＨＣＣ 和ＩＣＣ *佳截斷值分別是
８７．５ｎｇ·ｍＬ－１和８３．５ｎｇ·ｍＬ－１，ＡＦＰ 診斷 ＨＣＣ和ＩＣＣ 臨界參考值是２０ｎｇ·ｍＬ－１。
１．３ 統計學方法
計量資料采用ｘ±ｓ 表示。各組間的比較采用非參數秩和檢驗以及ｔ 檢驗，各構成比之間采用卡方檢驗，應 用單因素或多因素ｌｏｇｉｓｔｉｃｓ 回歸分析
ＧＰ７３ 與 ＡＦＰ 各自的效能并確定*佳臨界值。以
Ｐ＜０．０５為差異有統計學意義。所有統計分析過程均在ＳＰＳＳ１９．０軟件中完成。
２ 結 果
２．１ ＧＰ７３在 ＨＣＣ 組、ＩＣＣ 組和健康組血清中的表達比較
ＧＰ７３在 ＨＣＣ 組、ＩＣＣ 組和健康組血清中的表達水平逐漸降低，平均質量 濃度分別為 （２０３．５± １３６．３）、（１３７．９±１０１．９）和 （５８．２±５２．５）ｎｇ· ｍＬ－１，且 ＨＣＣ 組、ＩＣＣ 組與健康組相比差異具有統
計學意義（Ｐ＜０．０５）；ＨＣＣ 組與ＩＣＣ 組比較差異有統計學意義（Ｐ＜０．０５）