因elisa試劑盒操作步驟復雜，影響反應因素較多，在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。因有不少朋友們在實驗中都遇到了曲線的問題，昨日我公司楊經理與實驗的專業技術人員為其曲線問題找原因。
一 OD值不正常的可能原因是：
1、試劑盒未回溫，試劑盒回溫到25℃；
2、溫度控制不好，控制正確溫度；
3、孵育時間不準確，控制孵育時間；
4、洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增 加，洗滌4-5次，每孔250ul，然后拍干；
5、陽光直射，對著風直接吹，避風避；
6、酶標儀的波長錯誤，酶標儀的波長450nm；
7、抗體的稀釋錯誤，正確的稀釋抗體；
8、水質問題，用娃哈哈礦泉水代替。
二 白板的可能原因是：
1、洗滌液配制錯誤，正確的配制洗滌液；
2、少加液體（錯加液體），正確的步驟加液體。
三 無梯度可能原因是：
1、標準品也污染，換標準品點板；
2、OD值不正常，控制溫度時間在做一次；
3、人為點板，不要點板。
四 線性不好可能原因是：OD值不正常，控制溫度時間在做一次。