材料及給藥研究
2019年6月,愛爾蘭都柏林大學學院生物與環境科學學院&康威研究所在Small雜志發表名為《A
High‐Throughput Automated Confocal Microscopy Platform for Quantitative
Phenotyping of Nanoparticle Uptake and Transport in
Spheroids》的文章。該研究利用PerkinElmer高內涵Opera
Phenix系統,構建了完整的在3D微組織層面研究納米載體攝取和運輸的模型。
作者首先進行3D微組織培養和高內涵拍攝的優化,主要研究了培養條件和固定方法對不同濃度的基質膠的影響,并根據該實驗結果確定了培養方法、固定方法和基質膠濃度及用量。
此外,作者也通過順式到反式高爾基標記物(GM130、GalT和TGN46)的分布染色考察了高內涵的拍攝質量,證明PerkinElmer高內涵系統確實有極高的分辨率,用來研究納米顆粒的攝取情況是足夠的。
接下來,作者通過Harmony軟件對層切掃描圖片進行重構分析,獲取較大亮度投影和3D重構視圖,在此基礎上定量測量球狀體中NP吸收和滲透。
后,作者選擇了在納米顆粒胞吞作用中有功能的蛋白,通過RNAi沉默進行潛在基因篩選,確定該模型可用于評估3D微球NP的攝取和運輸過程。
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