一、實驗類型
提高型實驗
二、實驗原理
小鼠是醫學實驗最常用的一種動物,常用于藥物篩選、急性毒性試驗、采血制備抗血清、進行常規檢查或某些生物化學分析等,本實驗學習小鼠捉持方法、腹腔注射方法以及采血方法。
三、實驗方法
材料:
小鼠,注射器,生理鹽水,采血管,EP管,彎頭鑷子,酒精棉球等。
方法:
單手提持法:只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌尺側和小指夾住尾根部,然后用左手拇指和食指捏住頭頸部皮膚。
雙手提持法:右手提起鼠尾,放在鼠籠(或其他粗糙面)上,向后輕拉其尾,小鼠即固定于鼠籠上,迅速用左手拇指和食指捏住小鼠頭頸部皮膚,并以左手小指、無名指壓其尾部于手掌尺側。
腹腔注射:左手提起并固定小鼠,使鼠腹部朝上,酒精棉球消毒進針部位,右手持注射器將針頭在下腹部靠近腹白線的兩側進行穿刺,針頭刺入皮膚后進
針3mm左右,接著使注射針頭與皮膚呈45°角刺入腹肌,穿過腹肌進入腹膜腔,當針尖穿過腹肌進入腹膜腔后抵抗感消失。固定針頭,保持針尖不動,回抽針
栓,如無回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量為0.1~0.2ml/10g體重。
眼眶后靜脈叢采血:穿刺采用一根特制取血管,采血時,左手拇指及食指抓住鼠兩耳之間的皮膚使鼠固定,并輕輕壓迫頸部兩側,阻礙靜脈回流,使眼球
充分外突,提示眼眶后靜脈叢充血消毒眼睛周圍的皮膚。右手持取血管,將其尖端插入內眼角與眼球之間,輕輕向眼底方向刺入2mm~3mm,當感到有阻力時即
停止刺入,旋轉取血管以切開靜脈叢,血液即流入取血管中。采血結束后,拔出取血管,放松左手,出血即停止。用本法在短期內可重復采血。小鼠一次可采血
0.2~0.3ml。
摘除眼球采血:左手抓住小鼠頸部皮膚,輕壓在實驗臺上,取側臥位,左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,使眼球突出。用眼科彎鑷迅速夾去眼球,將鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完畢立即用棉球壓迫止血。
四、實驗結果計算
捉持小鼠之后,小鼠腹腔注射0.5ml生理鹽水,采集約0.2ml血液。
五、注意事項
1.抓小鼠尾巴應抓住尾巴中部或根部,能僅捏住小鼠尾巴的尾端,因為這時小鼠的重量全部集中到尾端,如果小鼠掙扎,有可能弄破尾端。
2.抓取小鼠時不可用力過猛,以防止引起小鼠窒息而死亡。
3.先計算需用藥量,再吸取藥液,注射前需排除氣泡,調整藥液至準確用量。了解小鼠腹腔注射給藥的常用注射量為0.2~1ml。
4.選用一次性無菌注射器,注射部位需消毒處理,針頭插入固定后方可注射,適當掌握注射速度,退針時要注意用消毒棉球壓迫止血。
5.幾種采血方法在一個動物身上進行時應先采出血量較少的部位的血,后采靜脈血,最后采動脈血。