一．目的要求
1掌握薄層熒光法的原理及操作。
2掌握薄層色譜法在中藥制劑鑒別中的應用。
二．基本原理
更年安片由地黃、澤瀉、五味子、制何首烏等藥味組成，可利用薄層色譜法對五味子和制何首烏進行鑒別。五味子中主要有效成分為木脂素類，五味子甲素為其主要有效成分之一，可吸收UV光，在硅膠GF254薄層板上形成暗斑，用對照藥材和對照品進行對照，可鑒別制劑中五味子；制何首烏中主要有效成分為蒽醌類，主要為大黃素和大黃素甲醚等成分，在可見光下呈黃色，在氨蒸氣中斑點呈紅色，紫外光（254nm或365nm）照射下產生熒光，在硅膠G薄板上可在可見光、紫外光或顯色后檢視其斑點，用對照藥材和對照品進行對照，可鑒別制劑中何首烏。
三．儀器與試藥
1、雙槽層析缸、玻璃板10×20cm、三用紫外線分析儀、分析天平(0.01mg)。
2、硅膠G、硅膠GF254。
3、五味子、何首烏（中國藥品生物制品檢定所）
4、五味子甲素、大黃素、大黃素甲醚（中國藥品生物制品檢定所）
5、更年安片（市售）
四．操作步驟
（一）五味子鑒別
1．薄層板制備：含0.3%的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板（實驗前自制）。
2．供試品溶液制備：取更年安片20片，除去糖衣，研碎，加氯仿30mL，置水浴上加熱回流90分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1mL使溶解，作為供試品溶液。
3．對照溶液制備：取五味子對照藥材0.5g，同上法制成對照藥材溶液。取五味子甲素對照品，加氯仿制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。
4．薄層層析：將薄層板的邊緣修飾整齊，作好標記。用毛細管吸取上述三種溶液各4μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚（30~60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15﹕5﹕1）的上層溶液為展開劑，預平衡15~30分鐘，展距10cm，取出，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，分別在與對照藥材色譜及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
（二）何首烏鑒別
1．薄層板制備：含0.5%氫氧化鈉溶液的硅膠G板（實驗前自制）。
2．供試品溶液制備：取更年安片，除去糖衣，研碎，加甲醇100mL，置水浴中加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水
10mL使溶解，再加鹽酸2mL，置水浴上加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚20mL分2次提取，合并乙醚提取液，蒸干，殘渣加氯仿1mL使溶解，作為供試品溶液。
3．對照溶液的制備：取何首烏對照藥材1.5g，同上法制成對照藥材溶液。取大黃素、大黃素甲醚對照品，加甲醇制成每1mL各含1mg 的混合溶液，作為對照品溶液。
4．薄層層析：將薄層板邊緣修飾整齊，作好標記。用毛細管吸取上述三種溶液各2μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（15﹕2﹕1）為展開劑，預平衡15~30分鐘，展距10cm，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，分別在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙色熒光斑點；置氨氣中熏后，可見光下檢視，斑點變為紅色。