1．葡萄球菌和大腸桿菌混合菌液。
2．結晶紫染色液。
3．革蘭氏碘液。
4．95％酒精。
5．番紅染液。
6．載玻片。
方 法
一、涂片標本的制備（見實驗一）
二、革蘭氏染色法
1．初染：在上述已固定的涂片上，滴加結晶紫染液，染色1分鐘，水洗。
2．媒染：滴加革蘭氏碘液，作用1—3分鐘，水洗。
3．脫色：滴加 95％酒精，并頻頻搖動玻片，至無紫色脫出為止（約20秒），水洗。
4．復染：加番紅染液，復染半分鐘，水洗，用吸水紙印干后，油鏡檢查。
結果：視野中可以察見兩種細菌：
葡萄球菌：紫色、球形、葡萄狀排列。
大腸桿菌：紅色、桿狀、散在排列。
【附】革蘭氏染色法各種染液的配制
一、結晶紫（Ｃｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ）染液
結晶紫 2.0g
草酸銨 0.8g
95％酒精 20ml
蒸餾水 80ml
先將結晶紫溶于酒精，草酸銨溶于蒸餾水中，然后將兩液混合，靜置４８小時使用。此染液穩定，置密閉的棕色瓶中可儲存數月。
二、革蘭氏碘液
碘 1.0g
碘化鉀 2.0g
蒸餾水 300ml
先將碘與碘化鉀混合，加水少許，略加搖動，待碘完全溶解后再加蒸餾水至定量。
三、脫色劑：95％酒精
四、復染劑：番紅（沙黃Ｓａｆｒａnｉｎｅ Ｏ）染液
沙黃（Ｓａｆｒａnｉｎｅ Ｏ） ０．２５ｇ
９５％乙醇 １０ｍｌ
蒸餾水 適量
將沙黃溶解于９５％乙醇中，待完全溶解再加蒸餾水至１００ｍｌ