液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀有“四高一廣”的特點:
1、高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
2、高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。
3、:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到zui佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
4、高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,進樣量在μL數量級。
5、應用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。
6、柱子可反復使用:用一根柱子可分離不同化合物
7、樣品量少、容易回收:樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。
液相色譜儀是目前應用zui多的色譜分析方法,液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。液相色譜儀要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。液相色譜儀應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
使用液相色譜儀時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,zui后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。液相色譜儀作為一種重要的分析方法,廣泛的應用于化學和生化分析中。液相色譜儀從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。
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