Q14: 新物體識別小鼠探索物體的總時間15s左右需要剔除嗎?觀察時間5min?
A: 有很多實驗就是設置的15s探索時間,只要標準統一,15s也是常用的參數。觀察時間上限我們一般設置為5分鐘,5分鐘和10分鐘都是主流時間,不過個人覺得5分鐘就夠了,不喜歡探索的小鼠即便你多等5分鐘也意義不大。
Q15: 條恐freezing%閾值的選擇 ,及結果的分析?
A: FC是集成度最高的設備,不同的設備對應不同的軟件,很多FC設備都是自帶軟件的,所以Freezing的閾值設置也有所區別,一般都是有一個移動的范圍和持續時間作為判斷是否僵直的參考(比如小鼠在間隔為100ms的采樣頻率下,連續2s每幀畫面的移動范圍不超過5%),但是又需要通過一些算法過濾掉呼吸引起的動作,所以一般需要參考不同軟件的說明進行設置。
Q16: 同一批小鼠可以把行為學都做了嗎?
A: 可以,但是不同的行為學之間最好間隔兩周以上,同時電刺激相關會讓小鼠產生應激性的實驗應該盡量放在行為實驗的最后進行,NORT一般可以做2次,我們實驗室以前一般是在8-9月齡時做一次NORT,18-22月齡時再做一次。
Q17: App Ps1兩轉鼠Aβ和Tua出現的時間?
A: 前者6-7個月出現,沒有tau形成的NTF。
Q18: 恐懼箱的聲音刺激55Hz夠嗎?箱體風扇的白噪音都有60Hz以上?
A: 我在課程里講的是引用了2014年JOVE文章中的設置。重點是作為Cue的聲音強度要和作為背景的聲音強度有明顯區別,強度單位是db,聲音頻率的單位是Hz,這兩個意義不一樣哦。
Q19: ymate需要對每個臂標記下嗎?
A: 需要,因為嚴格的Y迷宮實驗中每個臂都要輪換著用,所以需要標記以確保每個臂都會用到。
Q20: Y迷宮可以用人工分析嗎?
A: 可以,Y迷宮相對其他行為學而言因為只有次數和時間,可以人工分析,但一定要錄視頻。
Q21: 可以在同一天做Y迷宮跟曠場實驗嗎?
A: 沒有足夠的證據說明不能,但是一般原則是不同行為學實驗最好不要在一天做。我個人的理解是如果Y迷宮不是禁食的那種,且兩個實驗加起來8小時內就能完成,沒問題,如果需要超過12個小時,時間跨度太大,對小鼠的節律有影響。
Q22: 新物體識別,分析怎么取數據?
A: 具體可參考課件P22。
Q23: 新物體識別怎么分析,都自己手動計時?
A: 能用軟件就用視頻分析軟件吧,手動計時主觀性太高,嚴格來說,手動計時需要雙盲。
Q24: 水迷宮是不是需要做路徑分析?
A: 是的,雖然會多花一些時間,但路徑分析的意義在于即便小鼠在找到平臺的用時方面沒有區別,但如果路徑有區別也是能說明問題的,給自己多留條路比較好,而且Reviewer也經常會問的。
Q25: 水迷宮水溫的影響?
A: 水溫高,驅動力不夠,小鼠可能選擇漂浮;水溫低小鼠熱量喪失快,應激反應強,容易病或死。但是對于年老小鼠(16個月以上)需要參考其他文獻中的水溫設定稍微提高一點。
Q26: 請問上午下午做實驗有區別嗎?
A: 有區別,但是要看什么實驗,刺激越強的實驗區別越小。實驗盡量在8小時內完成,小鼠太多最好分批做,接近小鼠休息的時期或者小鼠剛休息完就進行實驗小鼠狀態的均一性較差(想想你自己上午和下午狀態是不是一致的)。