由于血清來源于動物,且含有細胞培養中所需的各種營養(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等),這奠定了血清是細胞培養實驗中最普遍的試劑的基礎。
目前血清采集地主要分布在以下國家:
市面上的牛血清產品名稱雖然五花八門,但根據其不同的特性,追其根本,大致可分為以下四種。根據牛的取血年齡可以區分:
胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹心臟穿刺采血得來的血清。
國產胎牛血清(并無明確定義,但通常用此命名)指的是出生4-6小時,且未進行哺乳(unsuckled)進食的新生牛,有時還稱作國產新生牛血清。
新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS,或稱小牛血清)指的是出生14天-3個月進行取血的牛血清。
成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS)指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛血清。
以上取血牛齡的差異主要是受當地國家畜牧業的發展及法規限制影響,因為牛血多為畜牧業副產業,并未有專門為取血而養的牛。
幾種血清的比較:
這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組分與比例不同。常規來說,年齡越小的牛血清,細胞培養效果越好。胎牛血清培養效果好于新生牛,且因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低。故目前多數實驗人員選擇的都是胎牛血清進行細胞培養。
胎牛血清根據實驗要求的不同又進行了特殊加工工藝加工,那么在這么多種類的血清面前,要怎么選擇適合自己細胞培養的那一款呢?
★ 我們需要知道都有哪些種類的牛血清和它們的用途:
1、透析血清
分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進行營養成分優化和標定特定成分進行研究的實驗中。
2、碳吸附血清
使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質,如某些激素、細胞因子、生長因子等,去除作用對分子量大小并無區分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養研究驗證激素的作用效果。
3、去外泌體血清
適用于收集細胞分泌的外泌體時使用。
4、低IgG血清
用于研究抗體、病毒和病毒反應、細胞表面抗原表位。
5、四環素血清
應用于使用敏感四環素誘導表達系統的細胞培養(Tet-on, Tet-off),以及其它對四環素敏感的實驗中。
6 、IR (輻照)
鈷60伽馬輻照劑量在3.5Mrad. 通過直接與間接作用將生物大分子(如核酸)鍵結破壞,人畜用藥物/疫苗,及對微生物負荷(Bioburden)要求最高水平的實驗。
7、HI (熱滅活)處理血清
56℃, 30Min, 破壞補體,確保細胞與抗體結合不會發生裂解。
8、胚胎干細胞(ES)專用血清
是從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號,適用于人及小鼠胚胎干細胞、成體干細胞及原代細胞長期培養。
9、間充質干細胞(MSC)專用血清
從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號,經過骨髓,脂肪組織及臍帶來源的間充質干細胞的細胞活性嚴格測試,通過傳代及分化比例測試。