尿紅細胞檢測是診斷泌尿系疾病,特別是腎病的重要實驗指標之一。顯微鏡檢查仍是目前檢測尿液有形成份的主要手段。隨著自動化尿液分析儀的問世,給尿液分析過篩檢測帶來了一些方便,但該型儀器是否受菌尿的影響,造成尿紅細胞實驗結果差異,迄今未引起注意,本文對此進行了研究,現報告如下。
1 材料與方法
1.1 標本來源 (1)菌尿:用一次性潔凈塑料尿杯隨機收集門診懷疑有泌尿系感染患者晨尿200例。(2)非菌尿:用一次性潔凈塑料尿杯隨機收集院內確診非泌尿系感染患者晨尿200例。(3)人工菌尿:用一次性潔凈塑料尿杯隨機收集我科正常性尿液50例,然后將這些尿液標本隨機加入培養細菌(屬泌尿系感染的細菌,專用培養基培養 [2] )使用細菌數為105~107/ml之間,同時用不加細菌的尿液作為對照組。
1.2 實驗器材 尿沉渣分析儀DiaSys R/S500(美國)FA100型尿液分析儀(山西亞森)及配套試帶(煙臺寶威批號:2004021201)單克隆潛血試紙(萬華普曼公司)。
1.3 實驗方法
1.3.1 尿紅細胞的測定 用尿沉渣分析儀、尿液分析儀(干化學法)和直接鏡檢法對紅細胞進行測定。其方法為:尿液混勻后,用一次性專用試管分別取非菌尿組和菌尿組尿液10ml,直接在DiaSys R/S500和FA100上,嚴格按說明書操作,記錄實驗結果(每天實驗前用質控對儀器進行監控)在高倍鏡下計數10個大方格的紅細胞數,以每微升紅細胞平均數報告,所有試驗均在2h內完成。
1.3.2 尿潛血的測定 尿液混勻后,直接將潛血試紙放入尿液中,30s后取出,在5min內觀察結果。結果判斷:在測試線及反應線上同時出現兩條紫紅色色帶者為陽性(潛血試紙對血紅蛋白的敏感性是0.2ng/ml),只在測試帶出現一條紫紅色色帶者為陰性。
2 結果
2.1 DiaSys R/S500和鏡檢法測定菌尿組和非菌尿組尿液 尿紅細胞結果分別為(204±123.0)×10 6 /L和(108±98.1)×10 6 /L。如果以鏡檢法檢查尿紅細胞為標準,則菌尿組UF-100測定紅細胞數假陽性率為21.5%而非菌尿組為6.5%。兩者經t檢驗,P<0.01,差異有非常顯著性。
2.2 FA100型尿液分析儀和單克隆潛血試紙法測定菌尿組和非菌尿組尿液 尿紅細胞(或潛血)結果如果以單克隆潛血試紙法檢查尿潛血為標準,則菌尿組尿液分析儀測定尿潛血假陽性率為19.5%而非菌尿組的假陽性率為4.5%。兩者經t檢驗,P<0.01,差異有非常顯著性。
2.3 50例人工菌尿加入前后兩種方法的測定結果 DiaSys R/S500測定紅細胞結果分別為(10±10.0)×10 6 /L和(45±28.0)×10 6 /L。經統計學處理,P<0.01,差異有非常顯著性。FA100型尿液分析儀在加入前后,尿潛血見表1。經非參數統計學處理,P<0.01,差異有非常顯著性。
表1 50例人工菌尿FA100紅細胞測定結果略
3 討論
顯微鏡血尿是一系列泌尿系病理變化的初始信號,因此沒有癥狀的血尿檢測對疾病的早期診斷顯得十分重要。同樣,血尿檢測的準確程度也同樣重要,因為基于陽性發現患者要經歷對身體有侵害和昂貴的泌尿學檢查。目前,顯微鏡和干化學檢查法是診斷顯微鏡血尿的兩種常用方法。干化學法具有快速、操作簡單,使得更具有吸引力。但是,干化學法在測定血尿中還存在一定的局限性,如尿中維生素C的存在會導致干化學法紅細胞檢查的陰性在泌尿系感染中,多數革蘭陰性菌和某些革蘭陽性菌可能釋放過氧化物酶,這些物質和酶在干化學法測定尿紅細胞時,都能使試帶中的過氧化氫茴香素或過氧化氫稀枯分解出氧原子, 后者使色源呈色而出現假陽性。本文結果顯示:菌尿組FA100型尿液分析儀測定紅細胞為陽性,而潛血板法為陰性,占總檢測數的百分比為19.5%而非菌尿組的百分比為4.5%同時又用培養細菌作成菌尿,再用尿液分析儀進行試驗測定其紅細胞,也得出同樣的結果。因此可以肯定菌尿對尿紅細胞測定有一定的影響。為了證實這一影響因素,我們進行了下列兩項實驗:(1)用常見的泌尿系感染的細菌,配制成不同濃度的細菌,放置15min后,用FA100型尿液分析儀測定其紅細胞,結果顯示由于細菌種類不同,對尿紅細胞測定結果影響程度也不相同(見表2),以假單胞菌屬最大,細菌濃度為10 4 /ml即影響紅細胞測定。(2)過氧化物酶配制成不同濃度,在用干化學尿液分析儀進行實驗,結果顯示:過氧化酶濃度為2U/ml時干化學法即呈陽性結果(見表3)。因此,我們認為菌尿是引起干化學法測定尿紅細胞假陽性的原因之一。
表2 不同常見菌尿對尿紅細胞測定結果的影響略
表3 不同濃度過氧化物酶對尿紅細胞測定結果的影響略
尿沉渣分析儀DiaSys R/S500是目前用于測定尿液有形成分最先進的檢測儀器,尿液中當細菌濃度超過一定時,本文結果顯示在菌尿和非菌尿尿液中,尿紅細胞DiaSys R/S500測定≥15/μl分別占總檢測數的21.5%和6.5%。兩者比較P<0.01,差異有非常顯著性,這就說明細菌對尿沉渣分析儀測定紅細胞也有一定的影響作用,Tsukahara也有相同的報道 [2] 。
總之,菌尿不僅干擾干化學法測定尿紅細胞,而且也影響尿沉渣分析儀對尿紅細胞測定,因此,在試驗中發現菌尿時,最好使用顯微鏡檢查法或者其他方法來加以鑒別,以免 出現不必要的誤診 [3] 。
參考文獻
1 Heang Ml.False“hematuria”due to bacteriuria.Arch Pathol Lab Med,1995,119:717.
2 Tsukahara K.Determination of the site responsible for hematuria.Shoni lgaku,1990,23:773.
3 McCauley J,farkus Z,Prasad S J,et al.Cyclosporine and FK506inˉduced inhibition of renal epithelial cell prolixferation.Transplantation Proceedings,1991,23(6):2829-2830.