大家都知道尿液乳糜試驗的原理:乳糜尿中的脂肪可溶解于乙醚中,而脂肪小滴可通過蘇丹 III 醋酸乙醇染色液或者猩紅染色液來識別。《全國臨床操作規程(第四版)》也給出了非常詳細的操作流程:
1. 取尿液加乙醚 取尿 5-10 mL,加乙醚 2-3 mL,混合震搖后,使脂肪溶于乙醚。靜置數分鐘后,2000 r/min 離心 5 分鐘。
2. 涂片加液 吸取乙醚與尿液的界面層面涂片,加蘇丹 III 醋酸乙醇染色液或猩紅染色液 1 滴。
3. 鏡檢觀察是否查見紅色脂肪小滴。
4. 結果判斷
(1)渾濁尿液:加乙醚后而澄清,則為脂肪或乳糜尿。
(2) 鏡檢涂片:脂肪滴呈紅色。
乳糜試驗萃取結果(圖略):
圖
1 a、b 圖為患者乳糜尿的標本,呈現乳化渾濁狀態;c、d 圖為乳糜試驗結果:c
右側為患者標本,加入乙醚后,尿液渾濁度減低,離心后出現明顯的三層結構(見左側圖),箭頭所指中間層便為含乳糜的萃取層,取中間層以蘇丹 III
染色,可見較多淡紅色圓形、橢圓形顆粒;d 左側為患者標本,右側為試驗結果(箭頭所指中間萃取層)。
(上圖來自:楊聰嫻. 重新探討乳糜尿的發病機制 [D]. 山東大學, 2008 年 5 月)
乙醚監管嚴格 購買困難
我們可以發現在乳糜試驗中的試劑用到一種化學品叫做「乙醚」的東西。乙醚是什么東西大家都知道,這里要說的是乙醚是屬于易制毒化學品種的第二類,購買該化學品必須根據《危險化學品安全管理條例》、《易制毒化學品管理條例》受公安部門管制。那怎么購買呢?度娘上的購買方法如下:
雙方簽訂有效的《購銷合同》(原件);
第一類憑《購銷合同》到所在地縣級以上公安局禁毒大隊簽發的《易制毒化學品購買許可證》;
第二、三類憑《購銷合同》到所在地縣級以上公安局禁毒大隊簽發的《易制毒化學品購買備案證明》(原件);
購買第一類易制毒化學品的經辦人的身份證明(復印件);
第一、二類《易制毒化學品運輸許可證》、第三類《易制毒化學品運輸備案證明》(均為原件)。
想想是不是都醉了,買個東西做乳糜試驗還得經過「三姑六姨婆」,還得簽各種文書,還得報「警察署署」。當然這是國家規定,畢竟這個會危害到公共社會,經常看到新聞中「乙醚手帕捂暈美女」,用的就是這東西,所以謹慎點還是好的。
乳糜試驗不一定非得用乙醚
但臨床醫生向檢驗科開出了試驗的申請,而如果檢驗科買不了乙醚,做不了該試驗該怎么辦呢?
那么乳糜試驗一定要用到乙醚嗎?是不是有另外的辦法可以來鑒別該尿液是否為乳糜尿呢?
答案是 yes。在了解無需用到乙醚的方法前,需先復習下基本功課。
先做好基本功課
首先,我們來了解下乳糜微粒到底是什么。
我們常說的乳糜微粒,就是上課時候老師說的脂蛋白(分為乳糜微粒、高低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白)的一種,單從字面上可以這樣子理解:脂(甘油三酯、膽固醇…)+蛋白。我們都知道脂肪(也就是甘油三酯 TG)與水是不能融合的,脂肪比水的比重輕,所以脂肪總要漂浮在水的上面。
我們攝入的所有營養物質均要通過血液送到身體的各個部位,以保證所有組織器官的營養供應。那么此時我們攝入的脂肪是如何進入血液的呢?這時候就需要載體蛋白來運輸。
腸道中的 TG 跟 Ch 會被腸上皮細胞吸收以及合成富含 TG 的乳糜微粒,圖中顯示乳糜微粒 CM 周圍跟著四種蛋白分別為:ApoⅠ、A-Ⅱ、A-Ⅳ、和 B48。ApoB48 含量多少與攝取食物的 TG 含量有關。包圍在 TG 周圍的四種蛋白護送著能量到達我們的血液中。起到從腸道運輸外源性脂肪的作用。它含甘油三酯 83%、膽固醇 8%、磷脂 2%、蛋白質 7%。是微粒最大,密度最小的脂蛋白。(重要說明:在乳糜微粒中,TG 占了絕大部分)
接著我們要知道乳糜微粒被制造出來后,怎么走?去哪里?
乳糜池是人體淋巴循環的一部分,處于胸導管起始處的膨大部收集腸干,左右腰干的淋巴,注入到胸導管中,再注入左鎖骨下靜脈,匯入血液中。乳糜微粒由腸上皮細胞合成并分泌入淋巴管。在腹腔中,由于不成對臟器(比如腸)的淋巴分別注入腹腔淋巴結、腸系膜上淋巴結和腸系膜下淋巴結。成對的器官(比如腎臟)的淋巴注入腰淋巴結。最后注入乳糜池。
乳糜微粒最終的去向:注入左鎖骨下靜脈,最終進入血液。
那么如果在這個任何環節的淋巴管由于機械性損傷及炎癥損傷,造成淋巴管壁的破壞,淋巴管曲張,淋巴液返流堆積,返流入腎臟的乳糜淋巴液,經腎乳頭附近的破裂口流出與尿液混合,形成乳糜尿。
乳糜試驗不用乙醚那么用什么?
上面說了那么多,就是想告訴大家,乳糜尿中有什么,怎么來的,去哪里了。
乳糜尿中主要包含著乳糜微粒、蛋白質等等,乳糜微粒中富含 TG,那么我們測定尿液中的 TG 來判斷尿液是否包含乳糜的理論似乎是可以的。理論當然是美好的,但是實踐中呢?是否可行?
文獻可以告訴我們答案。打開知網搜索關鍵詞如下圖所示:
其中一篇文獻中還提出了尿液中 TG 定量測定與定性結果有相關性,見表 1:
臨床小結
說了這么多,無非就是不想那么麻煩去買一瓶乙醚,而是通過更便捷,特異性更高的定量方法來代替傳統定性試驗。