(1)原理：某些可以產生一種胞外蛋白水解酶(明膠酶)，能使明膠分解為氨基酸，使明膠失去凝固能力而液化，因而使半固體的明膠培養基成為流動的液體。
(2)方法：將待檢菌接種于明膠培養基中，22℃培養7d或更長時間，每天觀察結果有無凝固。
(3)結果：如無凝固，則表示明膠已被水解，液化試驗陽性。如凝固，則繼續培養。
(4)應用：腸桿菌科細菌的鑒別，如奇異變形桿菌、普通變形桿菌、沙雷菌屬和陰溝腸桿菌等到能液化明膠，腸桿菌科中的其它細菌很少液化明膠。有些厭氧菌如產氣莢膜梭菌、脆弱類桿菌等也能液化明膠。另外，許多假單胞菌也能產生明膠酶而使明膠液化。