THP-1細胞( 人急性單核細胞白血病細胞)
規格:1×10^6/瓶 或1ml凍存管
細胞來源:ATCC
培養條件:RPMI-1640+10% FBS+0.05mM 2-巰基乙醇(貨號:HN-FBS-500)
細胞特性:懸浮(單核細胞樣)
溫度:37℃ 氣相:95%空氣,5%二氧化碳
運輸方式;復蘇細胞常溫運輸/凍存細胞干冰運輸
THP-1細胞( 人急性單核細胞白血病細胞)傳代:
1.用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基(以T25培養瓶為例)并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代,一般2到3天換一次液;
2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,傳代比例為1:3到1:6;
3.傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為最佳消化時間,記錄最佳消化時間,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之完全脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入完全培養基重懸細胞,進行傳代。
THP-1細胞( 人急性單核細胞白血病細胞)凍存:無血清細胞凍存液(貨號:H-W-100)
THP-1細胞( 人急性單核細胞白血病細胞)
注意事項:
1.該細胞對血清質量要求高,推薦使用HAKATA優等胎牛血清。
2.該細胞培養時需要添加0.05mM的β-巰基乙醇。
3.該細胞生長時,最高密度不能超過 1 X 106 cells/mL. 傳代時可以2- 4 X 105 cells/mL的密度進行傳代。
4.該細胞較難復蘇,建議優先訂購復蘇好的細胞。而若是對凍存細胞進行復蘇,凍存液融化后,應緩慢加入完全培養基,100-150g離心5min去除凍存液,并以20%血清濃度進行培養,并將T25培養瓶豎直放置直至細胞進入生長期。細胞狀態正常之后,再恢復到10%的濃度。
5.該細胞培養時可能會有部分細胞聚團生長,若細胞團塊過大過多,應當輕輕將其吹散。