1.什么是電壓鉗與膜片鉗,有什么區別?
答:電壓鉗技術是通過向細胞內注射一定的電流,抵消離子通道開放時所產生的離子流,從而將細胞膜電位固定在某一數值。由于注射電流的大小與離子流的大小相等、方向相反,因此它可以反映離子流的大小和方向。膜片鉗技術鉗制的是“膜片”,是指采用尖端經過處理的微電極與細胞膜發生緊密接觸,使尖端下的這片細胞膜在電學上與其它細胞膜分離,這大大降低了背景噪聲,使單通道微弱的電流得以分辨出來。采用電壓鉗技術將這片膜的電位鉗制在某一數值,可記錄到單通道電流。從這點上看,膜片鉗技術是特殊的電壓鉗技術。隨著膜片鉗技術的發展,它已經不僅僅局限于“膜片”的概念,也不僅僅采用電壓鉗技術,還常采用電流鉗技術。
2. 離子通道電導的單位是什么?如何換算?
答:離子通道電導的單位是西門子(Siemens, S),舊稱姆歐,即安培/伏特。常用皮西門子(pS),1pS=10E-12 S,
1,000 pS=1 pA/mV。
3. MultiClamp 700A中,在放大器和信號器的連接中,放大器的raw output是否需要連接信號器的 ANALOG IN 接口? scaled output,raw output有什么區別?
答:Raw output為原始信號輸出,放大器輸出的信號沒有經過處理(如濾波、放大等),scaled output為定標輸出,輸出的信號經過了處理。后者的靈活度大,因此多采用。目前膜片鉗放大器多設有scaled output,你可將其與數模轉換器(你所說的信號器)的ANALOG IN連接,這樣放大器的輸出信號就能傳送給計算機了,此時已經沒有必要再使用Raw output了。若你想記錄兩個輸出,則需要將Raw output與數模轉換器的另一個ANALOG IN連接。
4. 在Clampex的Edit protocol/Wave中,Step和ramp各有什么適用范圍?
答:Ramp多用于電流衰減緩慢的離子通道以及失敏不明顯的受體通道的I-V曲線制作,如多用于鉀、鈣離子通道。而像鈉通道,其衰減非常迅速,在持續去極化的情況下,通道很快失活,無法使用ramp,另外諸如煙堿受體通道等具有明顯失敏特征的受體通道也不宜采用ramp。
5. 什么是ramp?有什么作用?
答:與步階(step)不同,ramp在pClamp軟件中表示施加給細胞的一種逐漸變化的電壓或電流,稱為“斜坡電壓或電流”,可用于作通道I-V曲線。