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  • 發布時間:2021-06-09 15:31 原文鏈接: 葡萄糖6磷酸脫氫酶活性測定

    【測定原理】
    基本原理同葡萄糖‐6‐磷酸脫氫酶熒光斑點試驗,不同的是用紫外分光光度法定量測定酶活性。即每隔1分鐘在340nm 波長測定孵育液中NADPH 吸光度(共測6次),求出每分鐘吸光度增加的平均值,根據單位時間內NADPH 生成的量來計算G6PD 活性。葡萄糖‐6‐磷酸脫氫酶活性定量測定由于所用試劑及體系的不同,方法有多種:①WHO 推薦的Zinkham 法;②I CSH 推薦的Glock 與McLoan 法;③NBT 定量法;④Chap man 和Dern﹒法等。臨床常用前三種方法。

    【標本要求】
    用EDTA(每管含20μl 1.0mg/ml EDT A)或肝素(含0.02ml 的1g/L 肝素烘干的試管)抗凝血2ml 均可。若在4℃保存,可以穩定一周,但最好是在48 小時內測定完畢。

    【結果報告】
    單位定義:根據每升血液每分鐘催化反應1μmol 的NADPH 為1 個國際單位(I U),換算成每克血紅蛋白的G6PD 酶活性。

    【參考范圍】
    正常人G6PD 活性為:① WHO 推薦的Zinkham 法:(12.01 ±2.09)I U/gHb(37℃);②I CSH 推薦的Glock 與McLoan 法:(8.34 ±1.59)I U/g Hb(37℃);③NBT 定量法:(13.1~30.0)NBT 單位;④Chap man 和Dern﹒法:(2.8~7.31)I U/g Hb(25℃)。

    【臨床意義】
    G6PD 活性下降見于G6PD 缺陷癥患者。一般來說,患者測定值較正常平均值降低40%以上即可做出診斷。

    【方法學評價】
    本方法能準確地測定患者G6PD 活性,是一種確診試驗,在臨床上也較容易開展,所以臨床上該試驗是確診G6PD 缺陷癥的最主要實驗室測定手段。若在急性溶血期,如果G6PD 活性測定結果正常而又高度懷疑為G6PD 缺陷癥,應采取下列措施用以確定是否存在G6PD 活性下降:①急性溶血后2~3 個月復查G6PD 酶活性;②低滲處理紅細胞,測定處理后溶血的G6PD 活性;③將全血高速離心沉淀后,取底層紅細胞測定其G6PD 活性。如果G6PD 活性明顯降低,則診斷為G6PD 缺陷癥。如果在溶血發作期輸注了紅細胞,會使G6PD 活性的水平升高;新生兒或高網織紅細胞的標本,也會高些,所以要考慮到各方面因素對活性的影響。由于影響因素較多,所以最好同時作陰性對照和陽性對照。

    參考文獻: 
    1 王霄霞 俞 康.血液系統疾病的檢驗診斷.第1版.北京.人民衛生出版社,2007年01月


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