酶聯免疫吸附法(enzyme:linked:immunosorbent:assay,ELISA)是把抗原—抗體的免疫反應與酶的催化反應相互結合而發展起來的一種綜合性技術,它的靈敏度高,特異性強,特別是當寄主體內病毒濃度很低或同時存在病毒鈍化物或抑制劑時,它的優勢尤為明顯,因而是近年來病毒檢測方法中發展最快、應用最廣的一種方法。
此方法的原理是利用以酶標記的特異抗體來指示抗原—抗體的結合,從而檢出樣品中的抗原。
具體操作程序是:將待檢植物汁液(抗原)注入酶聯板(聚苯乙烯多孔微量反應板)中,使抗原吸附于它的孔壁,然后加入以酶標記的特異抗體,待抗原與抗體充分反應后,洗去未與抗原結合的多余酶標記抗體,于是在固相載體酶聯板表面就只留下以酶標記的抗原—抗體復合物。這時加入酶的無色底物,復合物上的酶催化底物降解,生成有色產物,其強度與病毒濃度呈正比。這一結果可用肉眼識別,也可用分光光度計對底物的降解量進行測定。