① 加抗體（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干
③ 加用非同種動物生產的特異性抗體（Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干
④ 加入酶標抗Ab-2抗體（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干
⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液
⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。
