自動酶聯熒光免疫檢測系統（VIDAS）篩選法
VIDAS 和 mini-VIDAS 是一種全自動免疫分析儀，如下圖所示，它集合計算機、鍵盤、打印機于一身，應用酶聯免疫分析原理，應用夾心技術，最終檢測藍色熒光（4-甲基傘形基磷酸鹽，ELFA），所測的熒光與抗原成正比。此方法已通過 AOAC 認可，AOAC996.08方法《食品中的沙門氏菌酶聯熒光免疫分析初篩方法（VIDAS?Salmonella［SLM］分析）》介紹如下。
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1、原理
此沙門氏菌的抗原鑒別是基于在 VIDAS 儀器內進行的酶聯熒光免疫分析。像吸液管的裝置是固相容器（SPR），在分析中既作為固相也作為吸液器。SPR 包被有高特異的單克隆抗體混合物。分析的每一步都是自動進行的。在前增菌、選擇性增菌和部分試驗的后增菌后，煮沸一定量的增菌肉湯加入試劑條，肉湯中的混合物在特定時間內循環于 SPR 內外。如果有沙門氏菌抗原存在則與包被在 SPR 內的單克隆抗體結合，其他沒有結合上的化合物被沖洗掉。接合有堿性磷酸酶的抗體在 SPR 內外循環與結合在 SPR 內壁上的沙門氏菌抗原結合，最后的沖洗步驟將沒有結合的接合劑沖洗掉。底物——4-甲基傘形磷酸酮被SPR壁上的酶轉換成熒光產物—4-甲基傘形酮。熒光強度由光學掃描器測定。實驗結果由計算機自動分析，產生基于熒光測試的試驗值與標準相比較后打印出每一個受試樣品的陽性或陰性結果報告。
2、試劑
①試劑條 六十條十個孔的聚丙烯條，每一條都由錫箔密封并都有固定的標簽。
②SPR 六十條，包被有抗沙門氏菌抗體。
③抗原標準液 一瓶（3mL），含有純凈的無活性的沙門氏菌抗原及0.1％的疊氮化鈉和蛋白質穩定劑。
④陽性對照 一瓶（6mL），含有純凈的無活性的沙門氏菌抗原及0.1％的疊氮化鈉和蛋白質穩定劑。
⑤陰性對照 一瓶（6mL），含有 TBS（Tris-緩沖生理鹽水）-吐溫及0.1％的疊氮化鈉。
⑥M肉湯 酵母提取物5.0g，胰胨12.5g，D-甘露糖2.0g，檸檬酸鈉5.0g，NaCl 5.0g，k2HPO4 5.0g，MnCl2 0.14g，MgSO4 0.8g，FeSO4 0.04g和0.75g的吐溫-80。加入1L的水加熱煮沸1～2min，分裝到16mm×125mm帶螺旋蓋的試管內每管10mL，擰松蓋子121℃高壓15min，旋緊蓋子保存。最終pH值應為7.0±0.2。
⑦診斷試劑 為可疑陽性結果的培養物鑒定分析所必須。見常規培養方法。
①～⑥可用生物梅里埃公司的 VIDAS Salmonella（SLM）分析試劑盒（BioMerieux Vitek，Inc.，595 Anglum Rd，Hazelwood，MO 63042-2320，USA）所有試劑貯存在2～8℃。可供60次測試。
3、設備
①VIDAS 或 mini-VIDAS 全自動免疫分析系統。
②培養箱 35℃±1℃和42℃±1℃。
③水浴箱 100℃。
4、通則
試劑盒內的全部試劑是作為一個整體使用的，不要將不同標號的試劑混合或任用。
試劑盒儲存于2～8℃使用前放置至室溫。在使用前將抗原標準液、質控標準液和煮沸過的測試肉湯各混合均勻。使用后將未用試劑立即放置2～8℃內。
每一組測試都包括一個陰性質控和陽性質控。
所有與細菌培養有關的材料或有生物危害的材料需處理和高壓后使用。
5、測試液準備
①前增菌 測試樣品在非選擇性的培基中進行沙門氏菌增殖。前增菌依產品類型變化，但必須按照 AOAC967.26或是最新細菌分析手冊，AOAC INTERNATIONAL，Gaitherburg MD20877-2417，USA，提供的方法進行。
②選擇性增菌 各轉接1mL前增菌培養物至裝有10mL SC 肉湯和10mL TTB 肉湯試管中。除未加工食品和有大量雜菌的食品外，SC 肉湯于35℃，TTB 肉湯于42℃分別培養6h，未加工食品和有大量雜菌的食品需培養18h±2h。
③加速增菌 培養后，轉接1mL TTB 培養物至10mL M 肉湯中，轉接1mL SC 培養物至另10mL M 肉湯中。除未加工食品和有大量雜菌的食品外，42℃培養18h。未加工食品和有大量雜菌的食品42℃培養6h SC 肉湯于35℃，TTB肉湯于42℃繼續培養24h±2h。
④加速增菌后 每一個 M 肉湯各轉接1mL 于不同試管并在沸水中加熱15min。剩余的 M 肉湯于4℃保存，在結果陽性時作確認用。
6、酶免疫測定
①試劑條上標注有所需編碼（1是食品測試樣品）。試劑盒提供每一系列測試所需的陽性對照（C1），陰性對照（C2）和抗原標準液（S1）。試劑條需恢復至室溫。
②混合均勻每一陽性對照、陰性對照和抗原標準液。
③各吸取0.5mL 陽性對照、陰性對照、抗原標準液和按（5）④步驟煮沸的M肉湯加入到試劑條的測試孔中。
④輸入適當分析資料建立測試數據。輸入“SLM”分析編碼，輸入測試號碼后運行。鍵入“S”是標準，“Pos”和“Neg”是陽性和陰性。
⑤把試劑條和固相容器（SPR）放入 VIDAS 中，按測試說明對 VIDAS 作相應選擇。
⑥按 VIDAS 操作手冊啟動分析程序，分析將在45min內完成。
7、結果顯示
計算機自動分析測試結果打印報告包括完成測試的項目，受試樣品的鑒定、日期和時間，試劑盒的編碼和失效日期，每一受試樣品的相對熒光值（RFV），測試值和結果說明。
RFV 值是最后讀數減去背景讀數；測試值是 RFV 與標準的比值。結果是在測試值和控制值與儲存在計算機中的極限值（0.23）比較后所得。如果測試值＜0.23則判為陰性；≥0.23則判為陽性。陽性結果需按常規方法所述的標準程序，用（5）④冷藏的 M 肉湯進一步證實。
當背景讀數在預先設置值（說明培養基有輕微污染）之上時，測試結果無效。這樣，需從（6）①開始重新分析。
VIDAS SLM 檢測的陽性結果可以用 VIDAS ICS/SLM [免疫濃縮沙門氏菌用 SLM 檢測（AOAC 2001.09）］試劑條濃縮樣液中的沙門氏菌。將增菌液（不要滅活）直接加入試劑備的樣品孔內上機，樣液上機后甚中的沙門氏菌與固相中的抗體結合，經清洗，將雜菌等清洗掉，再將結合的沙門氏菌洗脫至取樣孔中，使沙門氏菌濃縮、純化更易于檢出。45min檢測結束后取出，用棉棒從取樣孔內沾取樣液直接劃選擇性平板分離沙門氏菌。