硫酸多黏菌素E
書頁號：中國藥典2005年版二部p729
[修訂]
無菌 取本品，加 0.9%無菌氯化鈉溶液使溶解（溶液濃度以多粘菌素計為1.5萬單位/ml），用薄膜過濾法處理，沖洗液用量每膜不少于1000ml，分次沖洗后，以大腸埃希菌為陽性對照菌，依法檢查（附錄Ⅺ H），應符合規定（供注射用）。
【含量測定】 精密稱取本品適量，加 pH6.0磷酸鹽緩沖液溶解并定量稀釋制成高低劑量分別為每1ml中約含4000單位及2000單位的供試品溶液，照抗生素微生物檢定法（附錄ⅪA）測定。檢定菌為大腸埃希菌CMCC(B)44103；培養基為營養瓊脂培養基，調節pH值使滅菌后為6.5～6.6；緩沖液為pH6.0磷酸鹽緩沖液；培養溫度為35～37℃，培養時間為16～18小時。 1萬多黏菌素單位相當于1mg多黏菌素B。
【制劑】 （1）注射用硫酸多黏菌素B （2）復方多黏菌素B軟膏
[增訂]
【鑒別】 （2）在硫酸多黏菌素B組分測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液四個主組分峰的保留時間應與標準品溶液(a)四個主組分峰的保留時間一致。
【檢查】 硫酸多黏菌素B組分 照高效液相色譜法（附錄ⅤD）測定。
色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠（5μm）為填充劑（色譜柱的尺寸為250×4.6mm），以硫酸鈉溶液（取4.46g無水硫酸鈉溶解在900ml水中，用稀磷酸調節pH值為2.3后用水稀釋到1000ml）－乙腈（80：20）為流動相；流速為每分鐘1ml；柱溫30℃；檢測波長為215nm。取對照溶液(a) 20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖,多黏菌素B1的保留時間約為35分鐘，多黏菌素B2、多黏菌素B3、多黏菌素B1-I與多黏菌素B1的相對保留時間分別約為0.5、0.55、0.8，多黏菌素B2和多黏菌素B3色譜峰間的分離度應不小于3.0。
測定法 取本品50mg，精密稱定，用乙腈-水溶液（20:80）溶解，并定量稀釋至100ml，作為供試品溶液。另精密稱取硫酸多黏菌素B標準品50mg，用乙腈－水溶液（20:80）溶解并定量稀釋至100ml，作為標準品溶液(a)；取1.0ml標準品溶液(a)，置100ml量瓶中，用乙腈－水溶液（20:80）稀釋至刻度，搖勻，作為標準品溶液(b)。分別取上述三種溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至最大組分多黏菌素B1峰保留時間的1.4倍。量取多黏菌素B2、多黏菌素B3、多黏菌素B1-I與多黏菌素B1的峰面積，按下式，按干燥品計算，多黏菌素B3的含量不得過6.0%，多黏菌素B1-I的含量不得過15.0%，多黏菌素B1,B2,B3和B1-I的總含量不得少于80%。
式中：
CBi = 多黏菌素 Bi的百分含量；
ABi = 供試品溶液中多黏菌素Bi在色譜圖中的峰面積；
m1 = 供試品溶液中被檢測物的重量（mg），按干燥品計；
BBi = 標準品溶液(a)中多黏菌素Bi在色譜圖中的峰面積；
m2 = 標準品溶液(a)中硫酸多黏菌素B的重量（mg）；
DBi = 多黏菌素Bi在硫酸多黏菌素B標準品中的標示百分含量。
有關物質 多黏菌素組分測定項下供試品溶液的色譜圖中如有雜質峰，按面積歸一化法計算，單個雜質不得過3.0%，雜質總量不得過17.0%（供試品溶液中任何小于標準品溶液（b）主峰面積0.7倍的峰可忽略不計）。
硫酸鹽 取本品約0.250g，精密稱定，加水100ml使溶解，用濃氨溶液調節pH值至11，精密加氯化鋇滴定液(0.1 mol/L)10ml及酞紫指示液5滴，用乙二胺四乙酸二鈉滴定液(0.05mol/L)滴定，注意保持滴定過程中的pH值為11，滴定至紫色開始消退，加乙醇50ml，繼續滴定至紫藍色消失，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml氯化鋇滴定液(0.1mol/L)相當于9.606mg硫酸鹽（SO4）。本品含硫酸鹽按無水物計算應為15.5%～17.5%。
重金屬 取熾灼殘渣檢查下遺留的殘渣，依法檢查（附錄Ⅷ H 第二法），含重金屬不得過百萬分之二十。
微生物限度 取供試品10g，加無菌pH7.0氯化鈉－蛋白胨緩沖液至100ml，反復振搖，得到供試品溶液。細菌數、霉菌數和酵母菌數：取供試品溶液10ml，依法檢查（附錄ⅪJ 薄膜過濾法），以無菌pH7.0氯化鈉－蛋白胨緩沖液為沖洗液，每膜沖洗1000ml，并大腸埃希菌[CMCC(B) 44102]為陽性對照，應符合規定。控制菌：分別取供試品溶液10ml，按菌落計數項下方法，用薄膜過濾法處理，依法檢查（附錄ⅪJ 薄膜過濾法），應符合規定（供外用制劑用）。