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  • 發布時間:2021-12-21 12:00 原文鏈接: 生物樣品的前處理技術RNA的提取

    用0.14mol/L氯化鈉溶液將組織作勻漿并反復提取細胞質中的核蛋白,而留下含有DNA的細胞核物質,然后用10%乙酸調至pH4.2沉淀,離心棄去上清液,先用0.5mol/L氯化鈉溶液沉淀后用水洗滌沉淀,得核糖核蛋白后溶解于0.5mol/L碳酸氫鈉溶液中,離心,取上清液,調至pH4.2沉淀,以0.5mol/L氯化鈉溶液再一次除脫氧核糖核蛋白。核糖核蛋白中的蛋白質可用含少量辛醇的氯仿抽提除去,核酸留在碳酸氫鈉溶液中,加入乙醇,RNA以鈉鹽形式沉淀出來。

    破碎細胞做成勻漿時,加入去污劑十二烷基磺酸鈉或二甲苯磺酸鈉,加入含水苯酚,與勻漿一起振蕩,DNA與蛋白質沉淀于苯酚層,水層中含有RNA和多糖,然后用乙醇使RNA沉淀。苯酚法是目前提取不降解的RNA最有效的方法。


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