1.薄層板制備
取數塊10cm×10cm薄層板并排放置在水平臺上,稱取硅膠G 6g置研缽中,加水18ml,按順時針方向充分研磨混合,調成均勻糊狀物,去除表面氣泡后倒入涂布器中在玻璃板上平穩地移動涂布器進行涂布,取下涂好薄層的玻板,于室溫下置水平臺上晾干后,在110℃烘30min,冷卻后置于干燥器中備用。
2.供試品溶液的制備
稱取小蜜丸9g或大蜜丸1丸,切成小塊置研缽中,加硅藻土4g,研勻,細粉倒入100ml圓底燒瓶中,用量筒加入40ml乙醚,水浴低溫(約50℃)回流1h,濾紙濾過,濾液置于蒸發皿中,60℃水浴上揮去乙醚,殘渣加丙酮1ml使溶解,作為供試品溶液。
3.對照品溶液的制備
稱取丹皮酚對照品10mg,置10ml容量瓶中,用丙酮溶解并稀釋至刻度,作為對照品溶液。
4.展開劑的配制
用刻度吸管吸取環已烷18ml、乙酸乙酯6ml混合備用。
5.點樣
從干燥器中取出薄層板,檢查其均勻度,在反射光及透射光下檢視,取表面均勻、平整、無麻點、無氣泡、無破損及污染的薄層板點樣,用微升定量毛細管吸取上述兩種溶液各5μl,以垂直方向小心接觸板面使成圓點狀,點樣基線距底邊10mm,點間距離為10mm,每種溶液分別點兩次。
6.展開
在雙槽展開箱一側中加入展開劑20ml,密閉放置30min,迅速放入薄層板,密閉,展開,在展開約8cm時將薄層板取出,迅速在展開劑的前沿處做記號,晾干。
7.顯色和檢視
用噴霧瓶噴以鹽酸酸性5%三氯化鐵乙醇溶液,電吹風加熱至呈現藍褐色斑點。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。