吩噻嗪類藥物在合成過程中由于副反應,以及在貯藏過程中由于結構中的硫易被氧化且遇光分解,均會產生特殊雜質。如鹽酸異丙嗪中的特殊雜質主要為合成時產生的少量異構體雜質[N,N-二甲基-2-(10H-吩噻嗪-10-基)丙-1-胺]和貯藏過程中產生的降解產物。藥典將這些雜質規定為有關物質的檢查,采用高效液相色譜法控制其限量。
鹽酸異丙嗪中有關物質的檢查方法:避光操作。取本品,加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含0.2mg的溶液,作為供試品溶液;精密量取1ml,置100ml量瓶中,用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻作為對照溶液。照高效液相色譜法試驗,用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以水(用冰醋酸調節pH至2.3)-甲醇(55:45)為流動相,檢測波長為254nm。理論塔板數按鹽酸異丙嗪峰計算不低于3000,鹽酸異丙嗪峰與相對保留時間1.1～1.2的雜質峰的分離度應大于2.0。取對照溶液20μl注入液相色譜儀,調節檢測靈敏度,使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%,再精密量取供試品溶液與對照溶液各20μl,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時間的3倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積(1.0%)。
鹽酸異丙嗪的硫氮雜蒽母核中的硫為二價,易被氧化,遇光不穩定,故其有關物質檢查應避光操作,溶液也應臨用前配制。雜質限量的計算如下:
式中,L為雜質限量;C對為對照品溶液濃度;V對為對照品溶液體積;C供為供試品溶液濃度;V供為供試品溶液體積。