測量時,抗體先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗體反應結合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。