需要。細胞劃痕最重要的是線盡量畫直,且實驗組和對照組細胞寬度相近,保證實驗組和對照組可比性。
一般做劃痕實驗,一般都在無血清或者低血清狀態下培養的,否則細胞增殖就不能忽略按照6孔板背后劃線的垂直方向劃痕,可以形成若干交叉點,作為固定的監測點。
劃痕實驗是最簡單、經濟的研究細胞遷移的體外試驗方法,其原理是:當細胞長到融合成單層狀態時,在融合的單層細胞上人為制造一個空白區域,稱為“劃痕”。
劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區域使“劃痕”愈合。其一定程度上模擬了體內細胞遷移的過程,適合研究細胞與胞外基質(ECM)、細胞與細胞之間相互作用引起的細胞遷移。
一個要注意的問題,隨著細胞的不斷遷移,劃痕會不斷縮小,在計算不同時間點劃痕寬度的縮小時,不要計算其相除的比例值,而是要計算想減的差值。