高速逆流色譜的固定相和流動相都是液體,沒有不可逆吸附,具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優點。由于HSCCC與傳統的分離純化方法相比具有明顯的優點,因此此項技術己被廣泛應用于中藥成分分離、保健食品、生物化學、生物工程、天然產物化學、有機合成、環境分析等領域。
我國是繼美國、日本之后最早開展逆流色譜應用的國家。張天佑等在國內首先自行研制了分析型和制備型的高速逆流色譜儀,對我國中藥功能成分的分離制備取得了顯著成果。上海同田生化技術有限公司生產的高速逆流色普儀,分離中藥成分純度達到99%,可用于HPLC檢測標準樣。
高速逆流色譜 ( high-speed countercurrent chromatography , HSCCC )是 20 世紀 80 年代發展起來的一種連續高效的液—液分配色譜分離技術, 它不用任何固態的支撐物或載體。它利用兩相溶劑體系在高速旋轉的螺旋管內建立起一種特殊的單向性流體動力學平衡,當其中一相作為固定相,另一相作為流動相,在連續洗脫的過程中能保留大量固定相。由于不需要固體支撐體,物質的分離依據其在兩相中分配系數的不同而實現,因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等,不僅使樣品能夠全部回收,回收的樣品更能反映其本來的特性,特別適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質與液態固定相之間能夠充分接觸,使得樣品的制備量大大提高,是一種理想的制備分離手段。
它相對于傳統的固—液柱色譜技術,具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費用低等優點。目前 HSCCC 技術正在發展成為一種備受關注的新型分離純化技術,已經廣泛應用于生物醫藥、天然產物、食品和化妝品等領域, 特別在天然產物行業中已被認為是一種有效的新型分離技 術;適合于中小分子類物質的分離純化。我國是繼美國、日本之后最早開展逆流色譜應用的國家,俄羅斯、法國、英國、瑞士等國也都開展了此項研究。美國FDA食品和藥物管理局(Food and Drug Administration)及世界衛生組織( WHO )都引用此項技術作為抗生素成分的分離檢定, 90 年代以來,高速逆流色譜被廣泛地應用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。