1、器官分化及植株再生培養
將誘導的愈傷組織按類型分別轉入分化培養基上,置于連續光照，溫度20-22℃條件下培養3周，統計愈傷組織再生植株情況。
2、愈傷組織誘導的總體情況
煙草愈傷組織誘導培養4周后，愈傷組織基本形成，即排除因生長時間不夠而未形成愈傷的情況。具體情況見表一中所示。6瓶培養物均有愈傷形成，且都未發生污染，但誘導率幾乎各不相同。其中， 在光照條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為60.0℅，在黑暗條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為46.7%。由于實驗過程中，外植體即煙草葉片取得偏小，接種時可能已有部分外植體的大部分細胞脫水死亡，使整個實驗的愈傷組織誘導率偏低,愈傷塊偏小。