蛋白質濃度測定介紹:
蛋白質濃度測定是利用化學或物理方法測定蛋白質的濃度,是往往用于計算純化方法的回收率的重要方法。
蛋白質濃度測定正常值:
人體正常值一般是 60 - 80 g/L。
蛋白質濃度測定臨床意義:
異常結果:
(1) 雙縮脲法:雙縮脲法是第一個用比色法測定蛋白質濃度的方法,硫銨不干擾顯色, Cu2+與蛋白質的肽鍵,以及酪氨酸殘基絡合,形成紫藍色絡合物,此物在540nm波長處有最大吸收。雙縮脲法常用于0.5g/L-10g/L含量的蛋白質溶液測定。
(1) Lowry法:Cu+與蛋白質在堿性溶液中形成絡合物,然后這個絡合物還原磷鉬磷-磷鎢酸試劑(福林-酚試劑),結果得到深藍色物。此法比雙縮脲法靈敏得多,適合于測定20mg/L-400mg/L含量的蛋白質溶液。
(1) 紫外吸收法:大多數蛋白質在280nm波長處有特征的最大吸收,這是由于蛋白質中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于測定0.1-0.5mg/ml含量的蛋白質溶液。
需要檢查的人群:有軟弱無力疲乏、困倦,皮膚、黏膜蒼白,注意力不集中的人群。
蛋白質濃度測定注意事項:
不合宜人群:有明顯出血傾向的人群。
檢查前禁忌:檢查前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。體檢前一天的晚八時以后,應禁食。
檢查時要求:抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難。測定中,蛋白-染料復合物會有少部分吸附于比色杯壁上,實驗證明此復合物的吸附量是可以忽略的。測定完后可用乙醇將藍色的比色杯洗干凈。
蛋白質濃度測定檢查過程:
(1) 標準法制定標準曲線
取14支試管,分兩組按下表a平行操作。
繪制標準曲線:以A595nm為縱坐標,標準蛋白含量為橫坐標,在坐標紙上繪制標準曲線。
(2) 微量法制定標準曲線
取12支試管,分兩組按下表b平行操作。
繪制標準曲線:以A595nm為縱坐標,標準蛋白含量為橫坐標,在坐標紙上繪制標準曲線。
(3) 未知樣品蛋白質濃度測定
測定方法同上,取合適的未知樣品體積,使其測定值在標準曲線的直線范圍內。根據所測定的A595nm值,在標準曲線上查出其相當于標準蛋白的量,從而計算出未知樣品的蛋白質濃度(mg/ml)。
相關疾病
小兒蛋白質-能量營養不良,小兒脆性X染色體,病毒性肝炎
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營養不良