樣品處理:無菌取25g或25mL食品樣品,放入225mL滅菌生理鹽水中均質,制成10-1稀釋液。
增菌培養:將10-1稀釋液接入7.5%NaCl肉湯或胰蛋白胨肉湯中,37°C培養24小時。
分離培養:將上述稀釋液或培養液分別劃線血平板和Baird-Parker平板,置37°C培養24~48小時。金黃色葡萄球菌在血平板上呈金黃或白色菌落,大而凸起,表面光滑,周圍有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落為圓形,直徑2~3mm,顏色灰或黑色,周圍有一渾濁帶。
染色觀察:從平板上挑取可疑性菌落進行革蘭氏染色,金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性,顯微鏡下呈葡萄狀排列無芽胞、莢膜,直徑0.5~1μm。
血漿凝固酶試驗:吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌試液浸液肉湯24小時培養物充分混勻,置36±1°C培養,每隔半小時觀察一次,連續觀察6小時,出現凝固,即將小試管傾斜或倒置時,內容物不流動,判為陽性。同時做陰陽性對照。耐熱核酸酶試驗:將24小時肉湯培養物沸水浴處理15min,用接種環劃線刺種于甲苯胺蘭-DNA平板,36±1°C培養24小時,在刺種線周圍出現淡粉色者為陽性。本試驗金黃色葡萄球菌為陽性。