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  • 發布時間:2022-04-07 10:09 原文鏈接: 反義RNA技術要素

    [1]長的反義RNA并不一定比短的反義RNA更為有效;

    [2]在原核生物中針對SD序列及其附近區域的反義RNA可能更有效;

    [3]在真核生物中,對應于5'端非編碼區的反義RNA可能比針對編碼區的反義RNA更有效;

    [4]盡量避免在反義RNA分子中出現自我互補的二級結構;

    [5]設計的反義RNA分子中不應有AUG或開放讀框,否則該反義RNA亦會與核糖體結合而影響其與靶mRNA的配對結合;

    [6]進一步還可以將帶有ribozyme結構的RNA連在反義RNA的3'端尾上,當反義RNA與靶mRNA雜交后,即可利用其酶活性來降解靶mRNA。

    此外,為了增強反義RNA的作用,還可以采取一些額外措施,例如:

    [1]由于反義RNA對靶mRNA的抑制作用有劑量依賴性,所以在構建反義RNA基因時,要選擇強的、可以誘導的啟動子以增強反義RNA本身的表達;

    [2]構建許多個反義RNA基因串連在一起,以得到線性重復的多拷貝基因,對提高反義RNA的表達也有利;

    [3]RNA酶Ⅲ可以降解RNA:RNA雜交體,所以在構建反義RNA基因時,可將RNA酶Ⅲ的基因也同時轉化到靶細胞中并進行表達。這樣,當反義RNA與靶mRNA結合后,RNA酶Ⅲ即可將其降解。這顯然有利于反義RNA的抑制作用;

    近年來,有關反義RNA的研究進展迅速,已經應用到抗病毒感染,研究癌基因的作用機制,探索腫瘤治療的可行途徑等方面。在今后一段時間內,有關反義RNA的研究肯定將會有更加迅速的進展和更廣闊的應用前景。

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