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  • 發布時間:2022-04-22 12:45 原文鏈接: 超活染色實驗操作

    [1] 人口腔粘膜上皮細胞線粒體的超活染色觀察

    (1) 取清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金屬板上,滴2 滴詹納斯綠B 應用染液。 (2) 實驗者用牙簽寬頭在自己口腔粘膜處稍用力刮取上皮細胞,將刮下的粘液狀物放入載玻片的染液滴中,染色10~15min(注意不可使染液干燥,必要時可再加滴染液),蓋上蓋玻片,用吸水紙吸去四周溢出的染液,置顯微鏡下觀察。 (3) 在低倍鏡下,選擇平展的口腔上皮細胞,換高倍鏡或油鏡進行觀察。可見扁平狀上皮細胞的核周圍胞質中,分布著一些被染或藍綠色的顆粒狀或短棒狀的結構,即是線粒體。

    [2] 小白鼠肝細胞線粒體的超活染色觀察

    (1) 用脊椎脫臼法處死小白鼠,置于解剖盤中,剪開腹腔,取小白鼠肝邊緣較薄的肝組織塊,放入表面皿內。用吸管吸取Ringer 液,反復浸泡沖洗肝臟,洗去血液。

    (2) 在干凈的凹面載玻片的凹穴中, 滴加詹納綠B 應用液,再將肝組織塊移入染液,注意不可將組織塊完全淹沒,要使組織塊上面部分半露在染液外,這樣細胞內的線粒體表面可充分得到氧化,易被染色。當組織塊邊緣被染成藍綠色即成(—般需染20~30min)。 (3) 吸去染液,滴加Ringer 溶液,用眼科剪將組織塊著色部分剪碎,使細胞或細胞群散出。然后,用吸管吸取分離出的細胞懸液,滴一滴子載玻片上,蓋上蓋玻片進行觀察。

    (4) 在低倍鏡下選擇不重疊的肝細胞,在高倍鏡或油鏡下觀察,可見具有l~2 個核的肝細胞質中,有許多被染成藍綠色的線粒體,注意其形態和分布狀況。

    [3] 洋蔥鱗莖表皮細胞線粒中的超活染色觀察

    (1) 用吸管吸取詹納斯綠B 應用染液,滴一滴于干凈的載破片上,然后撕取一小片洋蔥鱗莖內表皮,置于染液中,染色10~15min。 (2) 用吸管吸去染液,加—滴Ringer 液,注意使內表皮組織展平,蓋上蓋玻片進行觀察。

    (3) 在高倍鏡下,可見洋蔥表皮細胞中央被一大液泡所占據、細胞核被擠至—側細胞壁處。細觀察細胞質中線粒體的形態與分布。

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