取本品約25mg,精密稱定,置25ml量瓶中,以甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取該溶液與內標溶液各5ml,置25ml量瓶中,以甲醇稀釋至刻度,搖勻,取5μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取黃體酮對照品適量,同法測定。按內標法以峰面積計算,即得。
本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集434圖)一致。取本品約5mg,置小試管中,加甲醇0.2ml溶解后,加亞硝基鐵氰化鈉的細粉約3mg、碳酸鈉及醋酸銨各約50mg,搖勻,放置10~30分鐘,應顯藍紫色。取本品約0.5mg,置小試管中,加異煙肼約1mg與甲醇1ml溶解后,加稀鹽酸1滴,即顯黃色。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水(65:35)為流動相;檢測波長為254nm。
理論板數按黃體酮峰計算應不低于1000,黃體酮峰和內標物質峰的分離度應符合要求。內標溶液的制備取己烯雌酚約25mg,精密稱定,置25ml量瓶中,以甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。
方法名稱: 丙酸睪酮原料藥-丙酸睪酮-高效液相色譜法
應用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測定丙酸睪酮原料藥中丙酸睪酮的含量。
本方法適用于丙酸睪酮原料藥。
方法原理: 供試品經甲醇定量稀釋并加入內標后,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長241nm處檢測丙酸睪酮的峰面積,計算出其含量。