1.饑餓試驗 讓患者完全禁食，定時(開始及每4 小時)檢測血糖、胰島素。患者不耐受禁食饑餓試驗，易出現低血糖反應，一般禁食24 小時后約85%陽性，48 小時后95%陽性，極少數(約2%)72 小時并增加運動才能出現陽性。若禁食后血糖＜2.8mmol/L，胰島素釋放指數＞0.4 者應視為異常。
2.藥物激發試驗
(1)甲苯磺丁脲(D860)試驗：空腹口服甲苯磺丁脲(D860)2g，為避免胃腸道反應，同時口服等量碳酸氫鈉，每1 小時采血1 次，共3 次，測定血糖和胰島素，正常人血糖下降不超過基礎值的40%，如下降低于基礎值65%，和(或)用藥后血糖水平低于1.7mmol/L(30mg/dl)，持續時間超過3 小時，或胰島素水平高于120μU/ml，則為異常。
(2)胰升糖素試驗：空腹快速靜脈注射胰升糖素0.03mg/kg 體重，總量不超過1mg，測3h 血糖和胰島素。正常人血糖上升超過基礎值的40%，若低血糖，胰島素水平高于150μU/ml，則為異常。
(3)亮氨酸試驗：按150mg/kg 體重計算亮氨酸劑量，在10min 內口服完，測3h 血糖和胰島素水平。正常人血糖不變化，如有低血糖而血胰島素水平高于40μU/ml，則為異常。
3.C 肽抑制試驗 給受試者注射外源性胰島素，以抑制內源性胰島素分泌，正常人內源性胰島素明顯受抑制，表現為血C 肽或胰島素水平顯著下降，常用方法按0.1U/kg 計算空腹時靜脈注射人胰島素，然后直接測定血C 肽水平，正常人用藥后血C 肽水平下降值超過基礎值的50%。而胰島素瘤患者血C 肽水平比基值下降＜50%。