出現頑固性上腹痛，疼痛放射至腰背部，夜間明顯，仰臥時加重，而蜷曲或前傾坐位可使疼痛減輕等，則高度提示胰腺腫瘤，需進一步做實驗室及其他輔助檢查。
B超、CT、MRI、ERCP、PTCD、血管造影、腹腔鏡檢查、腫瘤標志物測定、癌基因分析等，對胰腺腫瘤確定診斷和判斷能否手術切除有相當大的幫助。但是，外科醫師仍然不能忽視對患者的病史詢問和全面的體格檢查。要評估患者行根治性手術的安全性，詳細詢問病史和仔細體檢所獲取的資料比單一的心、肺功能檢查更為重要。一般情況下B超、CA19-9、CEA可作為篩選性檢查，一旦懷疑胰腺腫瘤，CT檢查是必要的。患者有黃疸而且比較嚴重，經CT檢查后不能確定診斷時，可選擇ERCP和PTCD檢查。如置管引流成功，對嚴重黃疸患者可延遲手術1～2周。MRI對胰腺癌的診斷價值并不優于CT。對已確診為胰腺腫瘤但又無法判斷能否手術切除時，為了避免不必要的手術探查，選擇血管造影和（或）腹腔鏡檢查是有臨床意義的。
