DNA 連接酶是生物體內重要的酶，其所催化的反應在DNA的復制和修復過程中起著重要的作用。DNA連接酶分為兩大類:一類是利用ATP 的能量催化兩個核苷酸鏈之間形成磷酸二酯鍵的依賴ATP的DNA 連接酶，另一類是利用煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 的能量催化兩個核苷酸鏈之間形成磷酸二酯鍵的依賴NAD* 的DNA 連接酶。
DNA連接酶(DNA Ligase)也稱DNA黏合酶，在分子生物學中扮演一個既特殊又關鍵的角色，那就是連接DNA鏈一個堿基3'-OH末端和它相鄰堿基的5'-P末端，使二者生成磷酸二酯鍵，從而把兩個相鄰的堿基連接起來。連接酶的催化作用需要消耗ATP。