優點
熒光原位雜交(FISH)法和輻射雜種細胞系(RH)技術是國際上最常用的基因定位的兩種方法,各有優缺點。FISH可以定位基因組中多個同源位點,結果直觀、可靠,而RH法則很困難。但是FISH法檢測步驟繁雜,尤其受探針大小的影響較大,2kb以下的cDNA序列很難定位,而且結果需要有經驗的細胞遺傳學家進行分析。RH法簡單易行,定位精度高,適合小于lkb--2kb以下的序列,根據統計學方法可直接定位。其結果也便于不同實驗室間比較。和其他作圖法相比,RH作圖法是依賴于輻射引起的斷點而不是靠減數分裂重組得到的斷點,是一種完全獨立的方法,所以是一個互補的作圖方法,可利用所有不同的STSs,具有巨大的DNA補充潛力,從而有利于整合不同的遺傳和轉錄圖以及所有基因組位標(無名序列、中心粒和端粒)。缺點
但是RH法也受到某些自身條件的限制,RH嵌板中每個雜交克隆均包括倉鼠和人的基因組DNA,可以看作是在倉鼠基因組DNA背景下相區別。如有些基因無法定位的原因即在于它的序列包括閱讀框架以及3,UTR區域與倉鼠的相似性高達90%以上。此外,做ESTs或全長cDNA定位的引物為cDNA序列,而RH法是在基因組DNA上擴增出相應的片斷,由于內含子序列的存在,擴增結果與引物設計的部位直接有關,一般應選用3,UTR部位的序列。還應指出,用RH法能否成功定位,依賴于該基因所在染色體區域上合適位標的存在。如果現有的RH圖中此區域分布的合適位標過少,可改用位標位點多的嵌板。因此隨著今后RH圖精度的提高,越來越多的STSs被放置于染色體上,有望彌補這個缺陷。