（1）腦脊液采集：取腦脊液3ml，即刻加至預先放有0.25mol/L EDTA Na2 50μl的冷試管中，迅速混勻，離心（3500r/min）10min，放－20℃保存。
取腦脊液1ml至提取管中，加無水乙醇3ml，置快速混勻器上1min，離心，上清液傾至15ml蒸發皿中，向沉淀物中加75%乙醇3ml重復提取一次。上清液合并，置55℃水浴上吹干。殘渣溶于0.5ml 50mmol/L pH6.2醋酸鹽緩沖液。
（2）組織樣品處理：活組織取得后即刻置氮氣中，快速稱取30～50mg于研磨器中，加50mmol/LpH6.2醋酸鹽緩沖液1ml，制成勻漿后即刻放沸水浴中3～5min。離心，取上清液放－20℃保存。
（3）標準工作液：取標準cAMP一瓶，加50mmol/L pH6.2醋酸鹽緩沖液1ml。另取試管7只，各加50mmol/L pH6.2醋酸緩沖液0.5ml，從標準液中吸出0.5ml至第一管，依次作倍比稀釋。此系列標準液50μl中含有0.125～8pmol。臨用前稀釋。
（4）10mm×100mm玻璃試管，NSB管加緩沖液150μl，S0管加緩沖液50μl，S1～7管加不同濃度標準液50μl，測定管加待測樣品50μl。
（5）向每管加酰化試劑10μl，即刻用力搖5～10s。各管加[3H]-SCAMP液50μl。
（6）除NSB管外，各加抗血清100μl。混勻，放4℃反應2.5h。向每管加冷緩沖液1ml。
（7）將反應液滴加至聯接抽氣泵的微孔濾膜上抽濾，再加2ml冷緩沖液洗滌反應管，亦加至膜上抽濾。取下濾膜，放80℃30min。
（8）將濾膜放至預先加有5ml閃爍液的計數瓶中，放2h后在自動液體閃爍測量儀上測放射性。
（9）以B0/B為縱坐標，標準管濃度為橫坐標，在普通方格紙上作圖，可得y軸截距為1的直線。依樣品管的B0/B值，從標準曲線上得至相對應的濃度。再乘10得cAMPnmol/L。