早期的植物固醇檢測方法有毛地黃皂甙法、酶法和可見分光光度法等。
毛地黃皂甙法的檢測原理為一分子固醇與一分子毛地黃皂甙形成白色絡合物，其操作復雜且靈敏度低。酶法的檢測原理為將固醇類物質皂化后，在膽固醇氧化酶的氧化作用下生成固醇酮和過氧化氫，經過氧化物酶催化，與4-氨基安替比林和酚發生顏色反應，然后在500nm處測定度．其操作復雜且重復性較差。
可見分光光度法的原理為固醇類物質溶解于氯仿后，與醋酸在濃硫酸的催化下發生顏色反應，在678nm處測定吸光值，其穩定性、重復性和靈敏度較好。
但以上方法只能檢測總固醇類物質含量，不能定量固醇組分，難以滿足工業和臨床檢測的需要。能夠對固醇組分定性和定量的檢測方法有薄層色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法HPLC等。
