國內外用于L-絲氨酸檢測的方法主要包括高效液相色譜法、茚三酮法、熒光淬滅法，酶反應法、紙層析-分光光度法等。其中高效液相色譜法其靈敏度好，準確度高，常用于L-絲氨酸的定量測定。茚三酮顯色法作為最基本最傳統的檢測方法，其操作簡便、反應快速，但是其對反應條件的要求較高，需要對反應溫度、pH、時間進行精確控制，并且對不同種類的氨基酸具有不同的靈敏度，不適合分析對精確性要求較高的樣品。熒光猝滅法可以避免大部分氨基酸的干擾，但是樣品需要經過復雜的磷酰化預處理，并且檢測結果誤差較大。酶反應法具有良好的專屬性和精準性，但是其反應速度過慢，反應體系中所用酶的純化步驟復雜，儲存條件限制多。紙層析-分光光度法操作簡便，適用于菌株篩選中氨基酸的定性檢測，但是其穩定性差，不適用大批量樣品的分析檢測。變色酸-分光光度法反應速度快，操作簡單，準確度高。準確、快速、高通量的檢測方法均可用于大量樣品的發酵液中L-絲氨酸的定量檢測。
近年來，對L-絲氨酸檢測分析的方法為高效液相法，這種技術可以精確定量L-絲氨酸含量，是目前L-絲氨酸定量檢測應用最廣泛的方法。一些快速簡便的L-絲氨酸檢測方法不斷出現或改良，如紙層析-分光光度法、變色酸-分光光度法等，雖然這些檢測方法的快速性得到很大提升但是精確性仍然不足。