1996年，nakane 建立了辣根過氧化物酶標記抗體的測定技術.由于該方法簡便，敏感，特異，可作為多種抗原或抗體的測定，20世紀70年代后期，該方法引入真菌毒素的檢測中，下面介紹的是競爭性酶聯免疫吸附間接法檢測黃曲霉毒素b1.
原理：將已知抗原吸附在固態載體表面，洗除末吸附抗原，加入一定量抗體與待測樣品（含有抗原）提取液的混合液，競爭培養后，在固相載體表面形成抗原抗體復合物.洗除多余抗體成分，然后加入酶標記的抗球蛋白的第二抗體結合物，與吸附在固體表面的抗原抗體結合物相結合，再加入酶底物.在酶的催化作用下，底物發生降解反應，產生有色物質，通過酶標檢測儀測出酶底物的降解量，從而推知被測樣品中的抗原量.