階段在胞質中進行,氨基酸本身不認識密碼,自己也不會到Ribosome上,須靠tRNA。
氨基酸+tRNA→→氨基酰tRNA復合物每一種氨基酸均有專一的氨基酰-tRNA合成酶催化,此酶首先激活氨基酸的羥基,使它與特定的tRNA結合,形成氨基酰tRNA復合物。所以,此酶是高度專一的,能識別并反應對應的氨基酸與其tRNA,而tRNA能以反密碼子識別密碼子,將相應的氨基酸轉運到核糖體上合成肽鏈。