方法名稱
潑尼松的測定—高效液相色譜法
應用范圍
該方法采用高效液相色譜法測定潑尼松的含量。
該方法適用潑尼松。
方法原理
供試品和內標均制成甲醇溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測潑尼松（C21H26O5）和內標乙酰苯胺的吸收值，計算出其含量。
試劑
1、甲醇
2、水
3、四氫呋喃
4、稀甲醇（1→2）
儀器設備
1、儀器
（1）高效液相色譜儀
（2）色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數按潑尼松峰計算應不低于3000。
（3）紫外吸收檢測器
2、色譜條件
（1）流動相：水四氫呋喃+甲醇= 688 250 62
（2）檢測波長：254nm
（3）柱溫：室溫
試樣制備
1、稱取供試品
取該品適量，精密稱定。
2、對照品溶液的制備
精密稱取潑尼松對照品適量，加甲醇溶解并稀釋成溶液。
3、內標溶液的制備
取乙酰苯胺適量，加稀甲醇制成每1mL中約含有0.11mg的溶液，即得。
4、供試品溶液的制備
上述供試品加稀甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.2mg的溶液，即得供試品溶液。
注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟
分別精密吸取上述供試品溶液與內標溶液5mL，置50mL量瓶中，用稀甲醇稀釋至刻度，混合均勻，取10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處測定炔諾孕酮和內標醋酸甲地孕酮的吸收值，按內標法以峰面積計算，即得。另取潑尼松對照品溶液，同法測定。